猜想大家可能都有过这种经历：导师要求你在实验室建立一个新的实验方法。比如想找一个细胞分选的好方法，从人的全血里做 CD4 + T 细胞的基因功能研究。 看起来还挺简单的，但，市面上细胞分选的方法实在太多了，怎么选择呢…… 方法有很多，最普遍的方法就是用特定抗体偶联磁珠来捕获细胞 。细胞与磁珠结合后，再利用磁分离器来分选。但具体选用何种方法，还是要看下游的研究。 如果目标是想在选出的 CD4 + T 细胞上做基因功能研究，因此不能采用会影响靶细胞基因表达或者会激活细胞的方法，还得获得大量高纯度、高活力的细胞。 阴选是做基因研究广为推荐的一种方法，间接的获得目的细胞。通常目的细胞上没有筛选标记。通过使用与所有非目的细胞结合的抗体混合物，将非目的细胞从样品中去除，就留下目的细胞了。 用磁分离器将无关细胞去除的这个方法其实不是很有效，因为一些没与抗体结合的细胞会被结合的细胞一起连带着选出去。因此，为了提高纯度，分选步骤得重复好几遍。所以阴选暂不考虑，因为最终要的细胞需要很纯且不能受分选影响… 因为细胞表面上有 CD4 标记，也许可以阳选。阳选是直接将目的细胞特异性分选出来，并且几乎不含非目的细胞。通常使用特定的抗体与磁珠偶联，结合目的细胞。 而在这种情况下，高亲和力抗体被标记在细胞上，会对许多下游研究产生影响。有时，结合在细胞上的抗体和磁珠可以被二抗的加入而移除。或者，结合物有的时候会自然而然的分离。但大部分情况下，磁珠被保留在目的细胞上，可能会对细胞造成机械压力 。 能不能有一个方法把阴选和阳选的优势都结合起来啊… Mohr et al. (2018)， 提到了一个叫「Fab-TACS」的技术，作者直接从全血中通过免疫亲和层析来纯化淋巴细胞，新颖又高效。 这个方法是来自德国的一家叫 IBA Lifesciences 的公司，他们针对细胞分选有多种 kits，而且包含这里要做的 CD4 + T 细胞。这个会不会就是要找的呢？ 经过搜查，Fab-TACS 技术是指 Fab-based Traceless Affinity Cell Selection，亲和无痕细胞分选。在 IBA 独家的 Twin-Strep-tag® / Strep-Tactin® 基础上，运用免疫亲和层析的原理，利用细胞表面抗原分子 CD marker 中的 Fab 片段，捕捉及释放目标细胞。能次次精准的从全血、小鼠脾脏和单细胞组织悬液中选出不带标签，未经激活的细胞。 原理很好理解。Fab-TACS 柱子填充有经 Strep-Tactin® 包被的细胞级琼脂糖基质，能与含有 Twin-Strep-tag 的 Fab 片段结合。 接着，将全血或是血液样本加入柱子，目的细胞就可以与 Fab 片段结合了，而非目的细胞被洗掉。 最后，加入生物素（biotin），因为 biotin 亲和力较高，会中断 Fab 片段与 Strep-Tactin® 的结合，此时 Fab 片段也同时脱离下来。Fab 片段因亲和力的降低，自发脱离细胞表面，无标记的目的细胞就到手啦！ 四步操作，就可以直接从全血中分离细胞，这确实是非常简单了。而且不涉及到磁珠的使用，也不用制备 PBMC，因此实际上其实是可以省下很多时间的！ Fab-TACS 技术属于阳选，可以得到非常纯的 CD4 + 细胞，选出的细胞没有标记，细胞表面无高亲和力抗体或者磁珠。可以将帮助进行基因研究而而且不影响 CD4 + 细胞的基因表达。 总的来说，这个方法的优点就是高得率、高纯度和高活力。 分享这篇经验，希望可以帮助到在苦苦找方法，或者是同做细胞分选的实验汪们。 文章来源：IBA 欢迎关注微信公众号【启帆医学BioSCI】, 公众号专注于生物医学研究、科研课题设计、SCI论文写作等领域的知识梳理和资料分享，科研临床两手抓，促进科研成果转化，为广大医务工作者提供便利。
不适合男人吃的5种食物，油炸食品垫底，牛奶排第二，建议了解食物是我们每个人维持生命的基础，也是我们内心小馋虫的意念所在。只不过，很多情况下，都会遇到美食与健康无法兼得的情况。这种情况对于男人们来说，尤为明显。男人们在生活方面，尤其是饮食上听人说早晨洗头是衰老的表现，这是真的吗？看下专业的解答你们有没有听说过这个传言说早晨洗头是衰老的表现，这让很多年轻人感觉纳闷，早上起来洗个头，保持完美的发型出门不是件很正常的事情吗？怎么就是衰老的表现了呢？在这里没有熟人的尴尬，没有无睡觉时总在凌晨34点醒？医生或暗示着3大病症，别忽视睡觉，是人类不可缺少的一种生理现象，人的一生中，睡眠占了将近13的时间，而睡眠质量的好坏与身体健康与否有着密切关系，由此可见，睡眠对一个人是多么的重要。睡眠对人类身体的影响是全方位吃苹果的注意事项苹果是中国市场上最常见，男女老少最常吃的水果，由于苹果的保质期较长，几乎一年四季我们都能尝到苹果。苹果果实球形，味甜，口感爽脆，且富含丰富的营养，是世界四大水果之冠。它的营养价值和自然疗法大师51岁死亡，除了排毒谬论，这3种健康理论也别信人民日报曾经在19年刊发的一则自然疗法大师死亡用生命验证断食排毒是谬论的文章中，证实曾经被无数人信奉追捧的养生大师林海峰，被证实已经去世，终年51岁。这位大师曾经鼓吹大米白面是毒药一失眠就吃安眠药，医生告诉你这是不对的只要一失眠就服用安眠药，这是一个很大的错误，很多时候失眠只是一个并发症，所以有时候失眠吃安眠药效果并不好，这种情况，就要分析引起失眠的原因。第一个是焦虑症，焦虑症的患者经常会因为心最常见的五种补铁的肉类（含肝脏），患有缺铁性贫血一定要收藏1。动物血。动物血中一般都含有较为丰富的铁元素，而且这里面的铁元素与人体铁离子相近，摄入后更容易被人体吸收，是补血的良品。如猪血鸭血等但不能生吃捂脸2。动物肝脏动物肝脏中铁的含量极喝水后一直小便的人，和半天不去厕所的人，哪类人更健康水像宝镜一样的湖水映出了蓝天白云的倒影映出了小草那绿油油的身影映出了牛羊喝水的身影。水源对我们集体来讲至关重要，不仅起到参与调整机体的作用，还起到了新陈代谢，排毒解毒的效果，人体有如何保持健康，这3个方面相当重要健康是我们永恒的追求，随着社会的发展人们对健康越来越重视，那么如何保持健康，这是我们日常生活中老生常谈的话题，要想保持健康必须注意以下3个方面1规律吃饭睡觉吃饱已经不能满足人们的需这个不能吃，那个也不能吃，天下的食物不就是拿来吃的嘛？常常看到有文章有专家说，这个不能吃，那个吃了也不好。天下的食物不就是拿来吃的嘛，这是它们的使命，您怕什么呀？只是任何食物都具有两面性，好的一面，不好的一面。只是它的哪一面更适合自己泡菜是肠道保健品？它能改善肠道菌群降低体重缩小腰围从目前的研究来看，泡菜含有多种维生素矿物质和纤维，有利于保持肠道健康。一肠道菌群觉得很赞德国酸菜（sauerkraut）韩国泡菜（kimchi）等发酵食品已经存在数百年了。过去，人