范文健康探索娱乐情感热点
投稿投诉
热点动态
科技财经
情感日志
励志美文
娱乐时尚
游戏搞笑
探索旅游
历史星座
健康养生
美丽育儿
范文作文
教案论文
国学影视

p53基因在翼状胬肉组织中表达的研究论文

  【摘要】 目的 通过观察p53基因在翼状胬肉组织中的表达,探讨翼状胬肉的发病与凋亡机制之间的关系。方法 选择25例翼状胬肉组织作为实验组,对照组选用正常眼鼻侧结膜组织,制作石蜡切片后常规HE染色和p53单克隆抗体免疫组化染色,实验数据进行秩和检验。结果 实验组中的p53蛋白含量显著高于对照组,两者差异有高度显著性(P<0.01)。结论 翼状胬肉病变发展的早期可能存在着p53基因的突变,从而使正常p53肿瘤抑制基因作用丧失,导致结膜组织过度增殖及胬肉纤维血管组织向角膜的侵袭。
  【关键词】 翼状胬肉 基因 p53 免疫组织化学
  翼状胬肉是一种临床上常见的眼表疾病,它以结膜下纤维血管组织呈三角形增生并向角膜侵犯为特征,多见于鼻侧睑裂区,常双眼发病,术后易复发。发展到一定程度可引起散光、视力下降、眼部不适感及美容问题,影响患者的身心健康[1]。关于翼状胬肉的病因和发病机制仍未明确,目前认为日光中的紫外线是最重要的环境致病因素。在紫外线氧化应激引起的DNA损伤中,p53基因是最常见的被损伤的基因之一[2]。本研究通过观察p53基因在翼状胬肉组织中的表达,探讨翼状胬肉的发病与凋亡机制之间的关系,为明确翼状胬肉的"病因和发病机制奠定基础。
  1 资料与方法
  1.1 一般资料
  25例翼状胬肉组织标本(实验组)随机取自中山市南朗医院眼科病人,均为原发性翼状胬肉患者,胬肉位于鼻侧。其中男10例,女15例,年龄为47 76岁,平均53.9岁。5例对照组为正常眼鼻侧结膜组织,年龄为51 62岁,平均55.8岁。所有病例均无其他角膜、结膜疾病。各组在年龄、性别、病程方面经统计学处理差异无显著性(P>0.05),具有可比性。选取胬肉头颈部组织,包括表面结膜样组织,对照组选自正常眼鼻侧结膜组织,距角膜缘约1 2mm,组织大小约3 4mm。取材后即置入10%的甲醛溶液浸泡固定,常规脱水、石蜡包埋。
  1.2 石蜡切片的制作
  从10%甲醛溶液中取出组织,流水冲洗过夜,依次采用乙醇梯度脱水,70%乙醇15s,80%、90%、95%、100%乙醇各3h,二甲苯透明3次,每次10min,从低熔点石蜡到高熔点石蜡浸蜡,共3次,每次1h。包埋,4μm连续切片,每个石蜡块切4 5张。
  1.3 HE染色
  将组织切片依次放入二甲苯脱蜡和95%乙醇各2次,每次1min;蒸馏水冲洗2次,每次5min;苏木精染色液浸染10min;流水冲洗5min;0.5%伊红乙醇浸染2min;95%乙醇和无水乙醇脱水各2次,每次2min;滴中性树脂,加盖玻片,光镜下观察翼状胬肉组织的病理学改变。
  1.4 免疫组化染色
  切片脱蜡至水化,橼酸微波抗原修复15min,3%H2O2室温孵育10min,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS浸泡3 5min,加入即用型鼠抗人p53单克隆抗体,4 过夜,PBS冲洗3 5min,滴加生物素标记的二抗,室温孵育30min,PBS冲洗3 5min,每张切片滴加约50μl抗生物素-过氧化酶溶液,室温30min。PBS冲洗3 3min。滴加新鲜配制的DAB溶液显色3 10min。用自来水冲洗,苏木素复染,中性树胶封固。以PBS替代一抗作为阴性对照。阳性对照片由福州迈新公司提供。
  1.5 结果判断标准
  以细胞浆内出现棕色或棕黄色颗粒为阳性染色,每张切片在高倍显微镜下(200倍)随机选择5个视野,计算每个视野阳性细胞率,取平均值作为该标本的阳性细胞率。根据阳性细胞数占上皮细胞的比例判断结果:0 5%为阴性 (-),5% 25%为弱阳性(+),25% 50%为中等阳性(++), 50%为强阳性(+++)。
  1.6 统计学处理
  采用SPSS 11.0软件,将实验组与对照组的实验数据进行秩和检验。
  2 结果
  2.1 HE染色
  2.1.1 正常结膜的组织学表现
  结膜分为上皮层和基质层。上皮层由3 5层细胞组成,表层为扁平细胞,中层为多边形细胞,基底层为立方形或柱形细胞。基质层为疏松结缔组织,其间有散在的毛细血管,少量成纤维细胞、淋巴细胞和中性粒细胞。
  2.1.2 翼状胬肉组织的病理学表现
  胬肉组织上皮层均可见不同程度的增生。上皮下组织可见成纤维细胞增生活跃、新生血管增多,在血管周围有大量炎性细胞浸润,有淋巴细胞、浆细胞和少量的中性粒细胞。
  2.2 免疫组化染色
  在翼状胬肉中,p53蛋白染色阳性细胞主要位于上皮细胞基底层。p53基因蛋白产物阳性反应呈棕黄色颗粒,在细胞核呈阳性表达。p53蛋白在两组中的表达见表1,翼状胬肉中的p53蛋白含量较正常结膜高,两者差异具有高度显著性(P<0.01)。表1 p53蛋白在翼状胬肉和正常结膜样本中的表达(略)
  3 讨论
  翼状胬肉是一种组织增生性疾病,以新生的纤维血管组织自球结膜生长向角膜表面侵袭为其特点。目前,关于翼状胬肉的病因和发病机制仍未明确。翼状胬肉的临床表现为新生的组织不断生长、增厚,并逐渐侵入角膜,手术切除后易复发,治疗效果不甚理想[3]。此特点与肿瘤组织相似,肿瘤发生发展的重要原因是细胞异常增殖和凋亡失衡。翼状胬肉的发病可能代表着细胞增生和凋亡的异常。
  目前,已发现的凋亡相关基因多达数十种,根据其功能的不同可分为三类:抑制凋亡基因,如Bcl-2、EIB等;促进凋亡基因,如p53、Bax、Fas等,双向调控基因;如c-myc、Bclx等。
  p53 基因参与细胞DNA的修复与合成,调节细胞的分化、凋亡,控制细胞的周期,是引起人类肿瘤发生最常见的突变基因。翼状胬肉的发生、发展与许多环境因素相关,如紫外线刺激、慢性充血和炎症等。其中,紫外线是最重要的环境致病因素,户外工作者(接受紫外线辐射较多) 的p53蛋白表达较户内工作者明显增多,提示紫外线可能引起p53蛋白的异常表达[4]。
  p53作为抑癌基因,主要的生物学作用是调控细胞周期和诱导细胞凋亡,维持基因组和细胞稳定,抑制肿瘤生长。p53基因定位于17P13.1,长度约20kb,由11个外显子和10个内含子组成,人p53蛋白由393个氨基酸组成,分子量为53 103。p53分为野生型和突变型,野生型为肿瘤抑制基因,可抑制在培养过程中有其他癌基因作用的细胞的转化和生长。而当p53基因发生丢失或突变时,改变原有的功能引起细胞生长的失控及转录即为突变型p53。突变型p53基因不仅引起p53抑癌活性的丧失,而且具有促进恶性转化的活性。野生型p53其蛋白产物半衰期较短,免疫组化法难以检测,p53基因突变可使该蛋白失活,在组织中堆积,通过免疫组化方法可以检测到。
  细胞增殖活跃是翼状胬肉生长和复发的重要基础。具有增殖活性的变性结膜上皮细胞侵入角膜,在多种细胞因子作用下,增生的球结膜进展性肥厚,成纤维细胞增殖和新生血管产生。本实验中翼状胬肉组织HE染色上皮层均可见不同程度的增生,最厚者可达20余层。上皮下组织可见成纤维细胞增生活跃、新生血管增多。本实验结果发现翼状胬肉组织p53蛋白表达较正常结膜增多(P<0.01),阳性表达呈细胞核型。我们推测翼状胬肉病变发展的早期可能存在着p53基因的突变,从而使正常p53肿瘤抑制基因作用丧失,导致结膜组织过度增殖及胬肉纤维血管组织向角膜侵袭。
  【参考文献】
  [1]徐锦堂,孙秉基,方海州.眼表疾病的基础理论和临床[M].天津:天津科学技术出版社,2002:287.
  [2]喻谦,柳林. 翼状胬肉发病机制研究进展[J].眼科研究,2008,26(9):713-716.
  [3]姚艳娇,刘新.翼状胬肉的治疗进展[J].国际眼科杂志,2008,8(9):1898-1901.
  [4]张梅,刘祖国,李永平,等.翼状胬肉上皮细胞p53 蛋白的表达及其功能状态的研究[J].中华眼科杂志,2002,38(2):115-117.

见字如面用一封信打开历史见字如面是由黑龙江卫视推出的一档明星读信为主要形式的阅读推广类节目。一封信,一个演员,一张讲台,简单却又庄重,播出后好评如潮,是对传统文化类节目样态的成功变革。该节目中通过朗读书信高校开展定向越野的历史与现状定向源自瑞典语Orientering一词,它原意是指借助地图和指北针,穿越未知地带。国际定向运动联合会2004年将定向运动定义为一项参赛者借助地图和指北针,在尽可能短的时间内到达若关于科举制历史意义及其局限性之思考为政重在择人,这是中国古代行政文化的重要观念之一。纵观中国历史进程,随着社会的发展变迁,选拔官吏的途径和方法也有所变化,包括世袭制军功爵制察举制纳赀制恩荫制以及科举制等等,其中对后如何更好的发挥革命历史博物馆的社会教育功能保护革命文化遗址,发掘历史文化资源,大力宣扬红岩精神,做好党员干部培训与爱国主义教育,传承科学文化与革命历史,深化红色旅游工程是重庆红岩历史革命博物馆的定位。为了深化功能,红岩历史文化背景知识和翻译文化背景知识和翻译文化背景知识和翻译文化背景知识和翻译AbstractItisagreedthatlanguageisacomponentofcultureandreflectsi时政新词汇的翻译试析时政新词汇的翻译试析时政新词汇的翻译试析时政新词汇的翻译试析摘要随着中国的快速发展,时政新词汇的翻译已引起越来越多的重视,此类词汇的翻译对译者提出了更高的要求。本文通过对现阶段一些四字格的优势四字格的优势四字格的优势四字格的优势摘要汉语四字格是经过长期锤炼而成的,是社会语言和文化的重要组成部分,是汉语语库里的一块瑰宝,体现出中华民族的智慧,体现了汉语语言的博大精深。四字科技英语中的美学修辞和翻译科技英语中的美学修辞和翻译科技英语中的美学修辞和翻译科技英语中的美学修辞和翻译摘要修辞分为美学修辞和交际修辞。本文以科技英语中的美学修辞为研究对象,通过美学修辞的三个方面即(音韵修分析大学英语翻译教学现状及翻译技巧分析大学英语翻译教学现状及翻译技巧分析大学英语翻译教学现状及翻译技巧分析大学英语翻译教学现状及翻译技巧更多精品源自教案摘要翻译教学是大学英语教学中的一个重要部分,不管是期末考试还是论大学英语教学中的翻译能力培养论大学英语教学中的翻译能力培养论大学英语教学中的翻译能力培养论大学英语教学中的翻译能力培养文章来自论文关键词大学英语教学翻译教学翻译能力论文摘要本文在分析大学英语教学现状的基础上,当前外语翻译教育教学面临的问题及对策当前外语翻译教育教学面临的问题及对策当前外语翻译教育教学面临的问题及对策当前外语翻译教育教学面临的问题及对策摘要社会的发展对于翻译的需求越来越多,然而受翻译的大环境的影响,当前外语
学会感恩的议论文生活是什么?我们苦苦追寻。从平淡中寻找温暖,从失败中寻找成长,从失意中寻找真诚也许生活就是这个寻寻觅觅的过程。我们在生活里搜寻到了太多的感动。当我们用最真挚的双手把它们怀抱胸前时,股权激励在企业财务绩效的影响论文摘要股权激励是企业经营管理体系中的重要激励方式,对于企业的健康发展有着重要的影响作用,在我国的企业股权激励模式中还存在着股权激励方案和相关制度设计落后股权激励力度相对较小以及经营业航海技术专业论文航海是人类在海上航行,跨越海洋,由一方陆地去到另一方陆地的活动。今天小编要给大家介绍的便是航海技术专业论文,欢迎阅读!航海技术专业论文摘要信息技术已经逐渐应用到人们生活和工作中的各初中思品教学小论文论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章,下面是关于初中思品教学小论文的内容,欢迎阅读!一开展社会实践活动,激发学生学习兴趣思想品德课本中编排了不少与学生生活中所关于医学论文杂志的分类一原来的杂志分类以前我们把医学类杂志分为三类中华级国家级和省市级。1中华级我们通常所说的中国类杂志,实际上指的是中华医学会通过各种中国杂志主办的杂志的质量和学术界一致认可的权威。现幼儿教学中的以人为本的意义论文以人为本,凸现互动的人性风靡世界的意大利瑞吉欧艾米利亚出版的儿童的百种语言一书中谈到教师角色时,曾运用了一句形象的比喻接过孩子抛过来的球,这句话表达了师幼关系间的深刻含义。它指出了合资铁路公司人事管理建设论文摘要公司为了更好的运营发展会采取科学有效的管理,无论什么公司的运营都与管理密切相关。当下,合资铁路公司的人事管理水平与我国铁路建设发展的需求存在差异。本文通过分析合资铁路公司人事管园林工程技术专业论文导语园林工程技术主要培养面向园林与建筑企业,从事园林工程设计生产经营销售及管理等工作的高技术应用性专门人才,主要开设于土建类专业为特色的院校。下面是小编为你准备的园林工程技术专业论关于使用多媒体课件的论文关于使用多媒体课件的论文随着计算机技术网络技术的飞速发展,多媒体技术倍受广大师生的青睐,多媒体课件越来越多的进入了学生的课堂,大大活跃了课堂气氛,给课堂教学带来了时代的气息。与传统论文章美文当我真的走进文学才发现,文学的天地就像宇宙一样的辽阔,我就像一滴水融入了大海,感觉到了自己的渺小最近我参与了一个网站的经营,在群里聊天的时候,我就说,我的积分要比超过谁,我的文章数小学科技论文三篇爱因斯坦曾说过科学研究能破除迷信,因为它鼓励人们根据因果关系来思考和观察事物。以下是小编整理的小学科技论文三篇,欢迎阅读!小学科技论文1在观察大自然的过程中我偶然发现,树干的形态都