天胡荽药材中槲皮素的实验鉴定论文

　　1仪器与试药
　　Agilent1100型高效液相色谱仪（自动进样品），二极管阵列检测器（DAD）；AB104N型电子天平（德国MettlerToledoGroup公司）；薄层色谱硅胶G（青岛海洋化工有限公司）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为重蒸镏水；槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100081200406）；10批天胡荽药材样品采自贵州各地，经笔者鉴定为伞形科植物天胡荽HydrocotylesibthorpioidesLam。和破铜钱HydrocotylesibthorpioidesLam。Var。batrachium（Hance）Hand。Mazz。exShan的干燥全草。
　　2方法与结果
　　2。1定性鉴别
　　2。1。1供试品溶液的制备
　　取干燥至恒重的天胡荽药材粉末约3g，精密称重，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇25盐酸溶液（41）提取液75ml，置水浴中加热回流1h，滤过，将滤液水浴蒸干，用适量蒸馏水溶解，移至分液漏斗中，加醋酸乙酯30ml（10，10，10ml）萃取，合并醋酸乙酯萃取液，减压回收醋酸乙酯至干，残渣加甲醇3ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。
　　2。1。2对照品溶液的制备
　　精密称取槲皮素对照品13。6mg，置50ml的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
　　2。1。3薄层色谱法4
　　照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及槲皮素对照品溶液各10l分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯醋酸乙酯甲酸（541）为展开剂，置盐酸蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。
　　2。2HPLC测定
　　2。2。1色谱条件
　　色谱柱为Dikma公司DiamonsilC18（250mm4。6mm，5）；流动相为乙腈0。1磷酸（4555）；流速0。8mlmin。检测波长370nm，柱温25。进样量10l。理论塔板数按槲皮素计算，应不低于5000。在此色谱条件下，槲皮素对照品、天胡荽药材的HPLC图谱见图12。
　　2。2。2对照品溶液的制备
　　精密吸取2。1。2项下的槲皮素对照品溶液1ml，置25ml的容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取干燥至恒重的天胡荽药材粉末约0。5g，精密称重，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25盐酸溶液（41）提取液25ml，称定重量，置水浴中加热回流1h，放冷，称重，用提取液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液5ml至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0。45m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
　　2。2。3线性关系考察
　　精密吸取槲皮素对照品溶液1。0，2。0，4。0，6。0，8。0，10。0l，进样，测定峰面积，以色谱峰面积为纵坐标，槲皮素进样量为横坐标，进行线性回归分析，线性回归方程：Y6442。9X1。4915，r0。9998，结果表明槲皮素在0。010880。1088g进样量与峰面积的线性关系良好。对照品溶液10l，连续进样5次，记录色谱图，结果槲皮素峰面积的RSD为0。19。取同一供试品溶液，分别在0，2，4，6，8，10h进样，记录色谱图，结果槲皮素峰面积的RSD为1。15。表明供试品溶液在10h内稳定。取同批药材5份，精密称定，按2。2。3项下供试品溶液制备方法制备并测定，槲皮素平均含量为0。11，RSD为0。96。
　　3结果
　　天胡荽为伞形科植物天胡荽或破铜钱的干燥全草，具有清热解毒、利湿之功效，用于黄疸型肝炎、胆结石、目翳1治疗。天胡荽含槲皮素（quercetin）、槲皮素3半乳糖苷（quercetin3galactoside）等黄酮类化合物2，其中槲皮素具有抗炎、抗氧化、抗癌和抗突变等多种功能3，是天胡荽药材的有效成分之一。通过实验发现，在槽内先加入展开剂，再在展开缸内用小烧杯盛上盐酸，然后进行薄层板预饱和30min，再展开，其色谱斑点圆而集中，分离度较好。天胡荽药材除了含有槲皮素外，还有多种黄酮苷，本文以盐酸和硫酸作为水解酸进行了比较，还对水解酸的浓度、溶剂和提取时间进行了考察。结果本文所用的条件较好。