雪灵芝的研究进展

　　【摘 要】雪灵芝系石竹科蚤缀属植物（Arenaria.spp），最早的用药记载可追溯到公元7世纪，随后在藏医典籍中的记载日渐增多，近十年来文献报道对雪灵芝的种群分布、化学成分、毒理、药理以及应用开发等方面进行了深入的研究。雪灵芝是藏药中的一支奇葩，具有重要的开发利用价值。本文概述了近些年来关于雪灵芝的研究状况，希望能够对雪灵芝的进一步深入研究和开发提供一些帮助。
　　【关键词】雪灵芝；毒理学；药理学；化学成分
　　雪灵芝系石竹科蚤缀属植物（Arenaria.spp），藏药名扎阿仲，多年生垫状草本，分布青藏高原海拔约5000m左右的永久雪线附近地带，采集十分不易，是当今地球上生长海拔最高的绿色开花植物之一，也是一种极为宝贵的野生藏药资源[1]。喜爱生长在高山草甸和石缝中，分布在青藏高原海拔4700-6000m左右的永久雪线的附近地带。广泛分布在青藏高原各地，资源十分丰富，但是采集十分不易[2]。藏药志、全国中草药汇编、中华人民共和国卫生部药品标准・藏药（1995版）等多部医药典籍记载：雪灵芝全草入药，性味甘寒，对胃肠溃疡、流感、肺炎、风湿、癌症、淋病、淋巴结核、黄疸、肾结石等有治疗作用[3]。近代医学研究表明，蚤缀属植物黄酮含量不高而皂苷含量较高，具有广泛的药理活性并含有多种生物活性的化合物[4-5]。
　　1 雪灵芝的化学成分研究
　　关于雪灵芝化学成份的研究，有文献报道，国外蚤缀属黄酮含量不高而皂甙音量较高，另外，尚含有生物碱、香豆素、多糖、氨基酸和微量元素。西藏太阳能研究示范中＂CADE＂课题组采用氨基酸自动分析投测定，雪灵芝还含有18种氨基酸，其中人体8种必需氨基酸齐全，并含有维生素A、硫胺素、核黄素、抗坏血酸、VitD、VitE等多种维生素，元素分析结果显示含有l0杂种微量元素，且具有较高的钙含量。1990年，中国科学院成都生物研究所研究员吴风努与日本东邦大学药学部学者小池一男、二阶堂进、大本太一从雪灵芝中分离出包括三萜、甾俸和黄酮等11个化合物，其中一个为新发现的甾体化合物，并对它们作了结构鉴定，此外，还从雪灵芝中分离出6个卡波啉生物碱，其中新发现的4个雪灵芝素A、B、C、D。用波谱法和化学法鉴定了化学结构：根据国内外对蚤缀属植物化学成份的研究结果表明，不同种类，不同区域，其化学成册含量差异较大[6]。
　　黄勇，须倩兮等采用恒重法（GB/T5009.3-2003）测得其水分含量为8.61%；采用550 灼烧法（GB/T5009.4-2003）测得灰分的含量为3.93%；采用凯氏定氮法（GB/T5009.5-2003）测得粗蛋白的含量为7.06%；采用索氏提取法（GB/T5009.6-2003）测得粗脂肪的含量为1.93%；采用斐林试剂测得总糖的含量为10.79%，还原糖的含量为7.28%[7]。龚受基，姜翠霞等采用分光光度法绘制标准曲线测定雪灵芝中总黄酮的含量取得了良好的效果[8]。刘小雪，田忠梅，叶建春等采用薄层扫描法（TLCS）测得其雪灵芝中的阿魏酸含量约为0.413%[9]。
　　2 雪灵芝药理、药效学试验
　　为了开发利用雪灵芝资源，青海医学院药理学教研室彭宝珠等人对雪灵芝的抗炎、抗免疫作用进行了研究。试验证明，雪灵芝不论是承提液还是醇提液均有抗炎、抗免疫作用，小剂量抑制免疫，但大剂量增强免疫，此时，抗体生成增多，胸腺和脾重明显增加。雪灵芝的抗炎、抗免疫作用类似可的松，且抗炎作用是直接的。此外，彭宝珠等人的试验研究还发现雪灵芝除抗炎、抗免疫作用外，尚具有解热镇痛作用，镇咳祛痰作用，抗乌头碱引起的心律失常作用，抗缺氧和降血压作用。该院冯伟力等人还用雪灵芝等几种藏药对小鼠免疫性肝炎的疗效进行了观察，结果表明雪灵芝对小鼠免疫性肝炎有明显的治疗作用，使SGPT活性明显降低，差异极显著。
　　华西医科大学公共卫生学院1997年所做免疫调节试验证明，各剂量均提高血清溶血素抗体积数水平，能提高吞噬百分率及吞噬指数，具有增强小鼠体液免疫和吞噬细胞吞噬功能的作用。另外，在抑制肿瘤试验中，雪灵芝可显著提高大鼠存括率和体重，肝癌发生率显著低于阳性对照组，对二己基亚硝胺（DENA）诱发的大鼠肝癌有一定预防作用，对肿瘤具有抑制作用。
　　雪灵芝对肝癌抑制效果的观察试验结果显示，雪灵芝粉、雪灵芝水提液和雪灵芝粗皂甙，经拌人饲料灌胃或腹腔注射，以5-氟尿嘧啶腹腔注射为对照，三次试验结果均显示，雪灵芝对肝癌有显著的抑制作用，其效果明显高于抗癌药5-氟尿嘧啶，试验中雪灵芝对正常组织如脾、肾、包细胞的抑制作用甚微，显著低于抗癌药5-氟尿嘧啶的毒副作用。
　　2.1 抗缺氧作用
　　雪灵芝能生长在海拔5000m的高山缺氧恶劣环境中，它的存在是经过自然长期选择的结果，也是适应环境的产物，说明该种植物具有良好的抗缺氧能力。张丽等[10]研究表明，雪灵芝溶液对大鼠脑缺血再灌注损伤具有良好的神经保护作用。灌喂了雪灵芝溶液的实验组与对照组相比，脑组织受氧自由基攻击的程度要远小于缺血组。当脑缺血再灌注后，雪灵芝可以提高脑组织中对氧利用，降低组织耗氧量，从而减少氧自由基的生成，减少氧自由基对脑组织的损伤。
　　雪灵芝能显著降低脯缺血再灌注损伤脑组织中丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的含量，降低乳酸脱氢酶（LDH）的活性，说明雪灵芝可能通过降低自由基产生，减少膜脂质破坏，降低NO生成等来发挥对脑缺血再灌注所致神经元的保护作用。苏红卫等[11]对雪灵芝全草的抗缺氧作用也进行了研究，结果表明，中、高剂量的雪灵芝能显著降低小鼠缺氧所致的肌性血管（MA）和部分肌性血管（PMA）比例升高。而且缺氧小鼠摄食雪灵芝后，组织有氧氧化酶的活性降低，表明机体缺氧状况得到该善，组织的耗氧量下降，氧利用率升高。因此，雪灵芝有抗缺氧以及阻抑慢性缺氧性肺血管结构重建的作用。柳丽[12]等雪灵芝抗大鼠运动性疲劳的研究表明雪灵芝能够显著提高SOD清除自由基的能力。MDA可间接反映机体受氧自由基损伤的程度，实验组含量显著低于对照组，这充分说明了雪灵芝能显著性的提高机体淬灭自由基，减少脂质过氧化作用，减少MDA的生成，提高机体抗氧化的能力。实验组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶含量比对照组明显升高，说明雪灵芝能提高Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性。芝能改善力竭性运动训练后NO的毒性作用，对机体淬灭自由基抗氧化作用有显著积极的作用。雪灵芝有促进堆积在大脑中LD的代谢，加快中枢疲劳的恢复。雪灵芝能有效提高大鼠运动能力，明显延长力竭运动时间，且具有协同运动训练，提高运动能力的作用；雪灵芝能有效的提高大鼠抗氧化能力，明显促进大鼠中枢性疲劳的恢复。   2.2 对心血管的作用
　　青海医学院在1983年就对雪灵芝的心血管作用进行了初步探索，采取静脉给药的方法，研究雪灵芝的降压作用结果显示，给药后狗血压开始有轻微上升，接着产生明显的降压作用，且幅度比较大。同时还研究了雪灵芝抗心律失常的作用，结果表明雪灵芝有抗乌头碱引发的心律失常作用，且作用和利多卡因相近。
　　2.3 抗炎作用
　　2.3.1 对炎症反应的影响
　　彭宝珠等[13]对雪灵芝对炎症反应的影响进行了研究，结果表明，雪灵芝水提物有抑制巴豆油诱发的小鼠耳部水肿和大鼠肉芽肿以及炎症渗出液的作用，对蛋清法和角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀急性炎症也有明显的抑制作用，抗炎作用强度与可的松相近。该学者还对雪灵芝的抗炎机制进行了探讨，认为雪灵芝不是通过刺激肾上腺皮质释放糖皮质激素而发挥抗炎作用的，而是皮质醇样直接抗炎作用。
　　2.3.2 解热镇痛作用
　　彭宝珠等[14]考察了雪灵芝对伤寒、副伤寒甲、乙混合菌致热家兔的降温作用及对小鼠热板刺痛的影响，结果表明，雪灵芝组免致热前后体温无显著性差异，具有持久的解热作用，而氨基比林组兔致热后1h有解热作用，3h后体温有回升作用，表明雪灵芝的解热作用比氨基比林强。另外雪灵芝有非常明显的镇痛作用，镇痛强度与度冷丁相近，而比氨基比林强。
　　2.3.3 抑菌作用
　　鲍敏等[4]用滤纸片扩散法对雪灵芝提取物进行体外抑菌实验，结果表明藏药雪灵芝的水提物和醇提物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、梭状杆菌等9种菌显示程度不同的抑菌作用，且随着抑菌浓度的增大抑菌效果逐渐增强。雪灵芝水提物除对痢疾杆菌没有抑菌作用外，对其余8种菌均有抑制作用；醇提物对梭状杆菌、痢疾杆菌、膨大芽孢杆菌没有抑菌作用，对其余6种菌均有抑制作用。
　　2.3.4 免疫调节作用
　　李凤文等[15]对雪灵芝调节小鼠免疫功能进行了研究，用高、中、低3个剂量的雪灵芝浓缩液给予小鼠灌胃30 35d，再对脾淋巴细胞转化、迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素、碳廓清、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性等7项免疫指标进行了测定。结果表明，雪灵芝在小鼠免疫系统中起着重要的作用，在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核一巨噬细胞功能3项都具有增强作用。
　　2.3.5 抗肿瘤作用
　　赵鹏等[16]观察了雪灵芝对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝脏肿瘤的预防及抑制作用。实验结果显示，雪灵芝各剂量组大鼠肝脏病理组织切片镜下观察及肝脏大体肉眼观察所见的癌变阳性率均低于模型对照组，其中病理组织切片所见癌变阳性率差异有显著性，表明雪灵芝具有降低二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌的发生率和抑制癌变进展的作用。迄今的化学研究表明，雪灵芝所属的蚤缀属植物含有生物碱、三萜类、阿魏酸等，现代药理研究表明，三萜皂甙、β一咔波啉及阿魏酸及环肽是抗癌活性成分，雪灵芝的抗肿瘤药理作用机制可能主要包括5个方面：抑制肿瘤细胞的有丝分裂、引起癌细胞程序性死亡、抑制酶活性、清除自由基及免疫调节作用[17]。
　　2.3.6 对消化系统的作用
　　1）促进消化
　　姚思宇等[18]研究了雪灵芝对消化系统的影响，结果提示雪灵芝能促进实验大鼠的体重增长，提高大鼠食物利用率，提高胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排除量；能明显促进便秘模型小鼠的小肠推进运动。因此藏药雪灵芝具有促进消化的功效。
　　2）保护肝脏
　　冯伟力等[19]考察了雪灵芝肝功能的影响，结果显示，雪灵芝3个剂量组对大鼠肝功能与空白对照组比较，血清谷丙转氨酶（GPT）无显著性差别，而雪灵芝中剂量组和可的松组均可明显降低肝微粒体酶P450值（P〈0.05），说明雪灵芝对肝微粒体酶有一定程度的抑制作用。雪灵芝高、低2个剂量组对犬肝功能与空白对照组比较或给药前后自身比较，GPT值均降低，高剂量组降低更显著（P〈0.05）。而雪灵芝对肝微粒体酶P450值恰高于对照组，这说明雪灵芝对肝脏无毒，并能增加肝微粒体酶的活性，有护肝作用。
　　3 雪灵芝毒理学研究
　　雪灵芝所具有的重要药用价值，促使科研人员对其毒理学进行深入研究。1990年青海医学院冯伟力等人用雪灵芝全草水煎液对小鼠进行了急性毒性试验，腹腔给药LD50=12.58g/kg；静脉给药LD50=20.57g/kg，皮下给药LD50=28.0g/kg；并设高、中、低三个剂量组对雪灵芝进行了长期毒性试验，结果与对照组无显著差异，且对肝脏有保护作用；雪灵芝致畸试验表明，对大鼠小鼠配对饲养，连续给药1个月，母鼠自然分娩观察子代无畸行，生长发育良好。华西医科大学公共卫生院营养与食品卫生学院教研室对雪灵芝进行急性毒性试验，结果表明根据食品急性毒牲分级雪灵芝属于无毒级，按《食品安全性毒理学评价程序和方法》，雪灵芝作为新资源食品是安全的。
　　4 雪灵芝的开发利用
　　地球之巅这块极其特殊的绝无污染的生态环境孕育了雪灵芝这一神奇的藏药资源。赋予她极有医疗保健作用的生物活胜物质，早在1000多年前，我国藏族同胞就开始对她进行了开发和利用。进入20世纪90年代，众多的科研人员也为之进行了不懈的努力，西藏自治区把雪灵芝的开发利用列入了重点研究项目，西藏太阳能研究示范中心组织多学科研究人员对雪灵芝的种群分布、资源贮量、生态环境、化学成份、毒理药理、医药、保健等方面进行长达7年之久的研究，于1994年通过了由国家科委、卫生部及四川医药食品界知名专家组织的鉴定，1995年被卫生部批准为新资源食品。西藏垒珠集团与西藏太阳能研究示范中心台作，并由西藏叠珠高原生物保健制品有限公司第一个在国内成功地开发出具有调节免疫、抑制肿瘤的高科技产品――雪灵芝营养液。
　　1998年国家卫生部正式批准为具有免疫调节、抑制肿瘤功效的保健食品。由他们共同承担的西藏雪灵芝开发利用项目已列入1999年国家火炬计划。目前，有关专家预测，随着对雪灵芝进一步深入研究，有望从雪灵芝生物活性成份中分离出具有抗癌活性的物质而开发出抗癌新药，并从雪灵芝中分离出包括三萜、甾体和黄酮等生物活性物质而开发出治疗流行性感冒、肺炎、黄疸型肝炎和风湿性疾病的新型中药。   综上所述，雪灵芝毒性极小，对心血管、消化系统、免疫功能等均有较强的药理作用，是具有很高药用价值的珍贵藏药资源。迄今为止的化学研究表明，雪灵芝含有三萜及其皂甙、生物碱、多糖、黄酮、苯丙素、甾体及丰富的氨基酸、维生素和微量元素。雪灵芝中已经阐明结构的19种化合物大部分是脂溶性较高的[20]。其中三萜皂甙、环肽、生物碱（β-咔波啉）、阿魏酸被认为是雪灵芝中重要的活性成分。近年来，三萜皂甙、环肽类化合物在抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、抗菌等方面的作用，已引起了广泛的关注[21]。目前对雪灵芝药理作用的研究还多停留在粗提物上，深入探讨其有效的化学成分及药理作用机制，对进一步开发和利用雪灵芝具有重要的意义。
　　【参考文献】
　　[1]赵鹏，李彬，姚思宇.雪灵芝对酒精性肝损伤保护作用的实验研究[J].中华中西医杂志，2004，5（17）：1901-1902.
　　[2]曹熙德.雪灵芝开发研究[J].中国肿瘤，2001，10（4）：227-229.
　　[3]雷宁，等.蚤缀属植物的种群分布、化学及药理研究进展[J].中国中医药信息杂志，2004，3（5）：23-15.
　　[4]鲍敏，米琴，曾阳.藏药雪灵芝不同提取物的体外抑菌作用实验研究[J].青海师范大学学报：自然科学版，2005，4：87-89.
　　[5]NowackaJ， O l eszek W. De t e r mination of Alfalf a（Medicago sativa） saponins by high-perfor mance liquid chromatograph y[J].A C h e m， 1994，42：727-730.
　　[6]曹熙德.雪灵芝开发研究[J].中国肿瘤，2001，10（4）：227-229.
　　[7]黄勇，许倩兮，彭光华.藏药雪灵芝中总皂苷含量的测定[J].青海师范大学报，2005，4（4）：87-89.
　　[8]龚受基，姜翠霞，李腾飞，等.雪灵芝提取物总黄酮测定及对小鼠的镇痛作用[J].时珍国医国药，2010，21（5）：1165-1167.
　　[9]刘小雪，田忠梅，叶建春，等.雪灵芝中阿魏酸的含量测定[J].华西药学杂志，2001，16（3）：222-223.
　　[10]张丽，黎霞，黄叶梅.雪灵芝对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用[J].四川师范大学学报：自然科学版，2007，3（3）：395-397.
　　[11]苏红卫，徐维光，刘军样，等.雪灵芝的抗缺氧作用[J].泸州医学院学报，2002，25 （5）：371-374.
　　[12]柳丽，黎霞，张丽.雪灵芝抗大鼠运动性疲劳的研究[J].四川师范大学学报：自然科学版，2009，3（32）：246-248.
　　[13]彭宝珠，车胜荣，余华保，等.雪灵芝的实验药理研究[J].青海医药，1983，4：32-35.
　　[14]彭宝珠，冯伟力，王利彦，等. 藏药雪灵芝对炎症和免疫功能的影响[J].青海医学院学报，1990，26（2）：68-76.
　　[15]李风文，赵鹏，刘蓉珍，等.雪灵芝调节小鼠免疫功能作用的实验研究[J].中国热带医学，2007，7（11）：1999-2002.
　　[16]赵鹏，姚思宇，王彦武，等.雪灵芝对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌组织细胞的抑制作用[J].中国组织工程研究与临床康复，2007，38（11）：7553-7555.
　　[17]成丽，伍贤学.蚤缀属植物中的三萜皂甙化学成分[J].中草药，2004，35（9）： 1076-1078.
　　[18]姚思宇，等.西藏雪灵芝促进消化作用实验研究[J].中国应用生理学杂志，2007，23（3）：332-334.
　　[19]冯伟力，王利彦，彭宝珠，等.藏药雪灵芝的毒理学研究[J].青海医学院学报，1990，26（2）：101-108.
　　[20]雷宁，张文山，杜树山.蚤缀属植物的种群分布、化学及药理研究进展[J].中国中医药信息杂志，2004.1l（10）：929-930.
　　[21]J I A A Q， TAN N H， Z HAOYX， e t a 1. Two new cclopept ides f rom Arenaria or eophila[J].Hely Chim Ac t a， 2003.86（3）：756.