系统性红斑狼疮患者Fas和CD40L表达的初步研究

　　作者：徐红星，邱德华，王慧娟，杨晓帆，季晓辉
　　【关键词】系统性红斑狼疮；Fas；CD40L
　　Keywords：systemiclupuserythematosus；Fas；CD40L
　　1资料和方法
　　1。3主要试剂晶美生物工程有限公司sFas检测试剂盒，BenderMedSystems公司sCD40L检测试剂盒，上海试剂二厂淋巴细胞分离液，GIBCO公司RPMI1640培养液，eBioscience公司抗人FasL、抗人CD40L阻断性抗体，Caltag公司PECY5抗CD
　　3、FITC抗CD
　　4、FITC抗CD8荧光标记抗体，eBioscience公司PE抗CD40L、PE抗Fas荧光标记抗体。
　　1。3方法
　　1。3。1sFas、sCD40L的检测严格按说明书进行操作。结果判断：用MicroReader4酶标仪比色，得到光密度（D）值，以标准品浓度作横坐标，D值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点，通过标本的D值可在标准曲线上查出其浓度。
　　1。4统计学处理数据采用plusmn；s表示，样本均数比较采用t检验。相关性检验采用Spearman等级资料进行分析，Plt；0。05认为差异有显著性。
　　2结果
　　2。1SLE患者与正常对照组血清sFas、sCD40L检测结果比较SLE患者血清sFas、sCD40L水平均明显高于正常对照组（P均lt；0。0
　　1），SLE患者血清sFas、sCD40L水平活动期均高于缓解期（Plt；0。01或Plt；0。0
　　5）。见表1。
　　2。2SLE患者血清sFas、sCD40L水平与SLEDAI积分的相关性分析及sFas、sCD40L水平之间的相关性分析sFas、sCD40L与SLEDAI积分之间均存在正相关关系（r0。6
　　8hr8、r0。253，P均lt；0。0
　　5），sFas与sCD40L水平之间未显示明显相关（r0。201，Pgt；0。0
　　5）。表1SLE患者和正常对照组血清sFas、sCD40L水平与正常对照组比较：Plt；0。05；Plt；0。01
　　2。4SLE患者CD4（）及CD8（）T细胞Fas与CD40L表达的相关性比较SLE患者CD4（）及CD8（）T细胞上Fas与CD40L表达均呈正相关关系（r0。3
　　1hr1、r0。517，P均lt；0。0
　　5）。
　　2。5SLE患者CD4（）及CD8（）T细胞在抗人FasL抗体及抗人CD40L抗体阻断前后CD40L及Fas表达的比较SLE患者T细胞培养中加入抗FasL抗体阻断后，CD4（）和CD8（）T细胞表面CD40L表达与阻断前比较均明显下降（Plt；0。0
　　5）；加入抗CD40L抗体阻断后，CD4（）和CD8（）T细胞表面Fas表达与阻断前比较差异无显著性（Pgt；0。0
　　5）。见表3。表3SLE患者CD4（）和CD8（）T细胞在抗人CD40L抗体阻断前后CD40L、FAS表达的比较与阻断前比较：Plt；0。05
　　3讨论
　　SLE是一种至今病因未明的系统性自身免疫性疾病。近来研究较多的是与自身免疫性疾病关系密切的T细胞表面分子Fas和CD40L，两者在自身免疫性疾病的发生、发展过程中起着极其重要的免疫调节作用。Fas是肿瘤坏死因子（TNF）受体超家族的细胞表面分子，其配体是FasL，FasFasL参与细胞凋亡过程；CD40L是CD40的配体，属TNF超家族成员，主要存在于活化的CD4（）T细胞表面，亦少量表达于CD8（）T细胞B细胞NK细胞单核细胞及血小板表面。表达于B细胞或抗原提呈细胞表面的CD40分子与其配体CD40L间的相互作用构成了一组重要的共刺激信号〔67〕。
　　研究表明，静止的T细胞表达一定量的Fas，但对凋亡不敏感，当抗原与T细胞受体（TCR）结合后，在静止T细胞被激活而增殖的同时，也启动凋亡，导致涉及凋亡的Fas基因转录增加，Fas表达上调，SLE患者T细胞表面表达的Fas增加〔8〕。同时有研究表明，SLE患者外周血T、B细胞表面CD40L表达增加，且活化T细胞表达CD40L〔9〕。说明SLE的发生、发展与凋亡调节分子和共刺激分子的异常密切相关。
　　最近，Collins等〔13〕发现，从莱姆病关节炎关节滑液中分离获得的Vdelta1T细胞高表达FasL，可通过FasFasL信号途径作用于不成熟树突细胞（DC）表面的Fas，促进DC的活化和成熟，B细胞在自身抗体持续产生中是否也起类似DC的作用值得深入研究。
　　迄今为止，尚未见到关于FasFasL可上调T细胞CD40L表达的研究报告。本研究的实验则初步提示了这种相互调节的可能。当然，这还需要进一步的深入研究加以证实。
　　目前SLE的发病机制尚不完全清楚，Fas、CD40L的高表达可能是SLE发病的重要原因，研究Fas及CD40L信号的相互调节可能会为探讨SLE发病机制及药物干预提供新的线索。
　　【参考文献】
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