摘要 为了选择严格的具有越冬能力的一年生抗寒蓝莓品种,促进选育优质品种,研究已进行到在人工降温的过程中对七种不同的蓝莓品种进行实地越冬能力的观察和相对电导率,MDA含量的测定。根据调查结果显示,在野外条件下,蓝莓不同品种表现差异显著,从Bluegold品种的56。67至Darrow品种的12。80。随着温度的降低,相对电导率的改变,一年生枝条中MDA含量和SOD有规律性的变化,他们的抗寒性是:Northlandgt;Chippewagt;Covillegt;Bluecroupgt;Darrowgt;Bluegoldgt;Powderblue。 关键词:蓝莓;品种;越冬能力;一年生枝 1。简介 蓝莓的越冬与冬季的低温和早春的生理干旱密切相关,它的越冬能力显示了广泛的差异归因于多种自然气候条件和人工栽培措施。即使在同一类型的气候,在不同品种间有着显著差异。越冬能力是衡量植物环境适应性的重要指标。因此,通过实地调查和测定生理生化指标来评估果树越冬能力被广泛应用在种类中实验中。目前,国内外已经深入进行了美国杏仁〔1〕,红树莓越冬能力〔2〕,黑茶藨子〔3〕,杏〔4〕,核桃〔5〕,辣椒〔6〕,等越冬能力的研究。 蓝莓是杜鹃花科的越橘属植物,大部分是灌木和小部分是乔木。蓝莓成熟后果实为深蓝色至紫色,,并且它是极少数产生真正蓝色果实的水果。蓝莓因其独特的保健营养价值在国际市场上收到了广泛的关注,它一直被联合国粮食和农业组织列为五个主要的健康食品之一,被戏称为第三代水果中的王者。然而,国内大多数品种属于北美品种;虽然在中国的山东和美国是它们的主要种植区,但是它们的气候显著不同,特别是部分引入的品种不能很好适应山东半岛冬季气温。为了这个目的,这项研究设计和完成一个模型关于7种不同的品种的抗寒性在青岛辽南区,为进一步种植和养殖打下基础,并为蓝莓的可持续和健康发展提供理论基础。 2。材料与方法 2。1。材料和抽样方法 2。1。1。测试站点和选择材料概况 测试材料是从沃林农业(青岛)有限公司潘家庄基地取得的,测试地在山东省青岛市胶南地区,那里是海洋性季风气候,有着温和的年降水量,夏季和冬季都很冷和潮湿,四季分明,202天的无霜期,每年日照2447。1小时。年平均降雨量为798。3毫米,每年的梅雨天是8397和温度10?C;平均暴雨日数为24年平均湿度是70以上,相对湿度位居全省最高。年均气温是12。1?C,最低气温在一年内为10,最高温度为36。 对越冬能力的调查从2011年3月在潘家庄基地开始。2011年,最低温度达到13。0?C,这出现在1月16日,比2010的最低气温11。9低了1。1,比2009年最低气10。5低了2。5。测试对象包括Bluecroup((JerseyPioneer)(StanleyJune)),Bluegold(),Coville(GM37Stanley),Chippewa(),Darrow((WarehamPioneer)Bluecroup),Northland(Berkeley(LowbushXPioneer))andPowderblue(TifblueMenditoo)。抽样对象是5到6年长势良好的树木。 2。1。2。抽样方法 在2011年3月,进行了一个对该领域的所有品种的越冬情况的调查和分级。在2010年12月下旬,随机选择正在生长的,温和的一年生30CM长的没有病虫害,没有顶端组织,将他们带回实验室进行低温逆性和抗寒性的实验。 2。2。测试方法 2。2。1。对不同品种的进行现场越冬调查 该试验的选择完全随机的个体植物,反复进行15次,调查对象是56岁的树木。该测试采用了z的抽样方法,只有一个分支从每棵树的四个方向选择(东,西,南,北,)。具体分级损伤率标准如下:0级:无萌芽;1级:一年生枝部分皱;2级:一年生枝大部分皱,干燥;3级:一年生枝条全部干枯;4级:地面之上部分全部萌发。根据评分标准,在调查之后一个关于所有品种的枝条发芽状况被建立。 2。2。2。低温胁迫过程 该试验设计采用完全随机的方法,每个处理重复3次。抽样对象是56年长势良好的一年生枝条。用蒸馏水清理挑取的枝条;水分被蒸干后,将他们分装,并将它们放置于冰箱中人工模拟冷却过程。该加工温度分别为8,16和24。冷却速度为2H1,冷却12h后,每次取20g测定相关指标。 2。2。3。指数测定 电解液的渗透率:测定方法采用电导法 MDA含量:MDA含量采用TBA法测定 SOD活性:SOD活性采用NBT法进行测定 数据分析:Excel中采用的原始数据的处理和利用SPSS19。0进行分析。 3。结果与分析 3。1。在蓝莓枝条发芽调查 入冬后,不同品种的蓝莓受伤的症状不同。其中,一年生分支受害最深。那些遭受伤害的部位至少在干瘪的芽上会有一些褶皱的皮,更糟糕的严重的褶皱会覆盖整个枝条使其变成灰棕色,使其花蕾干瘪死亡,甚至危害两年和三年的分支机构。从冬天到春天冻害变得越来越严重,并且,由冻害引发的萎凋是发生在冬天的从下部到上部的。萌发也可能导致死亡,但它是从上部到下部,这恰好从二月中下旬到三月中下旬当温度升高时,它变干,多风和曲折再冷后突然变暖〔12〕。风力现场试验可达到7级,大多数蓝莓死亡从上部到下部,这也恰好发生在23月。从这一点,我们可以做一个判断,即发芽是主要的 在蓝莓越冬过程中造成伤害的原因。 2011年3月对于7种不同蓝莓受损伤的程度品种的调查,参见图1和表1。通过方差分析,不同品种的萌发是显著不同。其中,Bluegold受到最多,达56。67。bluegold的萌芽常发生于一年生干涸的枝条。Bluecroup发芽的百分数仅为25。00而它出现在许多主要分支是完全干涸。萌芽其中,百分比达罗的是最少的,这是只有12。80。 3。2低温胁迫在一年生蓝莓枝条上对电导率的影响 随着低温胁迫的加强,植物细胞膜的脂质氧化性与膜通透性增加,从而导致溶质渗透,和导电性的增加。相对电导率反映了多少细胞膜受到影响。相对导电性越高,受到的影响越大。因此,电导率渗透值方法已经成为果树抗寒性研究的重要方法。 在0,8,16和24条件下,已经测得7种不同品种蓝莓的电导率,选见图2和表2。 随着温度的降低,所有品种的一年生枝条遭受的伤害越来越严重,电导率也显著增加,但是不同的品种在不同的温度下存在一定不同的差别。当温度达到1624,由于低温所造成的损伤对所有的品种都下降,一年生枝条没有死,但是所有品种的电导率已经达到57。8275。29。 从图2中,我们可以看到,当它为08C,低温所导致的伤害和电导率的增加对Northland和Chippewa是最高的,这高达0。5842倍和0。5454倍,而在Powderblue的增加是最少的,只有0。0008倍;当它是816C时,低温导致的伤害对Northland和Chippewa是最少的,只有0。4885倍和0。2294倍,但低温对其他品种造成的伤害很大,其中的Powderblue的电导率的增加是最大的,高达0。8554倍;当它是816,多数品种受损最严重的;当它是1624,由于温度所导致的伤害对所有的品种下降,但是不同品种的导电性已经高达57。8275。29,这表明,当它是24时,所有品种的体外组织已经受了重伤,膜的渗透性被破坏,电解质的渗透率特别是PowderblueandBluegold电解质的渗透率已经达到70以上。通过对冻害进行方差分析,所有的品种有显著不同。基于图1中所述的电导率值,我们可以得出一个结论,即7个品种的蓝莓抗性是不同的,从高到低的排列是Northlandgt;Chippewagt;Covillegt;Bluecroupgt;Darrowgt;Bluegoldgt;Powderblue。 3。3不同品种的一年生枝MDA测定 MDA是膜脂过氧化的最终产物它的含量为膜脂过氧化的重要指标。研究表明在植物材料中MDA含量,可作为植物抗寒性的重要指标。 参见图3和表3的在不同温度水平下7种不同品种的MDA含量结果差异(CK),0,8,16和24。MDA含量方差分析结果表明每个品种在不同低温下有显著不同。。他们所有的含量的增加特别是Bluegold。可以从表2中看出,随着温度在0?Cto?8?C之间快速的升高降低,不同品种的MDA含量增加不同,其中Bluegold具有最大的增长速度达到153。在8至16C,除了Northland,所有的品种MDA含量增加显著。Bluegold拥有的最大增幅达到271。每一个品种在8至16C的时候受破坏的程度最高。Bluegold的MDA含量在1624仍然增加最迅速并且达81。44。但是,Powderblue有最高的MDA含量达到0。5688molg?1。经过方差分析和多重比较,Powderblue,Bluegold,Darrow,Bluecroup,Coville,ChippewaandNorthland的一年生枝条MDA含量有四种水平的逐步减少,植物细胞膜的不饱和脂肪酸含量直接关系到植物的抗寒性。在低温条件下活性氧氧化不饱和脂肪酸致使过氧化。植物细胞的过氧化通常发生在植物器官老化或者在不良条件下时,并且在受伤严重时会产生 MDA,常常采用测量细胞的MDA值来作为衡量细胞过氧化程度的指标。MDA含量越高,植物的抗寒性越弱,反之亦然。表2表明,7种不同品种的MDA含量是不同的。因此,它们的抗寒是:Northlandgt;Chippewagt;Covillegt;Bluecroupgt;Darrowgt;Bluegoldgt;Powderblue。 3。4。不同品种一年生枝条的SOD含量测定 在正常条件下,在植物细胞中生产和消除游离基(O,O2,OHandH2O2。等)是平衡的,从而保持细胞膜系统的稳定性和维持正常的生理代谢活动。当植物细胞处于多种严峻的压力时,这种平衡将被破坏,自由基将会累积,进而导致加剧膜脂过氧化,导致膜系统的损害,严重的致细胞死亡。SOD是植物中消除自由基的主要酶。它的活性体现了植物对不良环境和植物抗寒性的适应性。 参见图4和表4在不同温度水平下7种不同品种的SOD含量结果差异(CK),0,8,16和24。在植物细胞中,超氧化物歧化酶主要用来消除超氧自由基。经过方差分析,同一品种的SOD含量在不同温度下是显著不同的。如从图3可以看出,每一个品种SOD含量的变化规律随着温度的改变而变化是不同的。Bluegold和Darrow的超氧化物歧化酶含量在8至16时增长最迅速,分别达41。79和24。39,而在0至8增长相对比较缓慢。然而,其他5种品种的一年生枝条SOD含量在16和24增长最为迅速。从品种的角度来看,在24时Chippewa的一年生枝条SOD含量可达12。872Ug而Powderblue只有5。4907Ug因此,在低温胁迫下,超氧化物歧化酶活性与不同品种的抗寒性呈正相关,即抗寒性越高,SOD的活性越强。7种品种的抗寒性是:Chippewagt;Northlandgt;Covillegt;Bluecroupgt;Darrowgt;Bluegoldgt;Powderblue。 4。讨论 发芽是因为春天多风,干燥。初春变得温暖后,果树蒸腾作用强烈。然而,土壤解冻晚,根部吸水困难,这因此引起根部吸水和植物蒸腾的严重失衡。在蓝莓的实验中发芽常发生于一年生的枝条中,蓝莓的芽分离早在先前的年份已经完成。,发芽对来年的开花与结果具有相对的不利的影响。 涂抹抗萌剂,在秋季加强水肥管理,在冬季进行防风可以有效的阻止芽的萌发。在该实验中,对所有实验品种相对电导率变化的总趋势是随着温度的降低相对电导率增加。低温可以对原来的质膜位置造成损伤。细胞膜通透性的变化是低温胁迫的关键,低温导致细胞膜损伤,导致膜的通透性变化,导致物质大量流失,最后导致细胞死亡。因此,植物受危害程度和耐寒性可以通过的通透性变化反映。膜内电导率可以通过相对电导率表示。在实验中发现Northland和Chippewa在8到16受损伤最小,而其它品种的损伤增加,这反映了这两个品种对于低温和强寒条件具有较强的环境适应性。此外,在实验中发现对于大多数品种当温度到达?16?C这个临界温度是能力急剧增加。