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从堪称诺奖成果到被扒出实验无法复现,韩春雨如今能翻案

  2021年9月3日,普渡大学Kevin V Solomon团队在Nucleic Acids Research(IF=16.97) 在线发表题为 "NgAgo possesses guided DNA nicking activity " 的研究论文,再次发掘出 NgAgo 在基因编辑方面的潜力,并为看似矛盾的报告提供了新的见解。
  事件回顾
  2016年5月,《自然—生物技术》发表韩春雨团队新的基因编辑技术NgAgo,被媒体以"甘坐冷板凳、十年憋大招"的故事原型炒作而走红。此后半年,韩春雨个人及其所在大学陆续获得各类名誉和大量经费资助,随后被媒体热捧,称其为"三无"教授但有"诺奖级"发现。
  韩春雨资料图
  8月,数名国外学者实名称多次实验后,仍未能做出结果。并建议《自然-生物技术》介入,要求韩春雨公开原始数据。韩春雨曾回应,质疑不科学,并称已有实验室重复成功。
  2017年8月,《自然—生物技术》发表题为《是该数据说话的时候了》社论,宣布撤回韩春雨团队于2016年5月2日发表在该期刊的论文。
  2018年9月,河北科技大学发布公告,韩春雨团队不存在主观造假。但依据有关规定,取消韩春雨所获得的荣誉称号,终止韩春雨团队承担的科研项目并收回科研经费。
  韩春雨团队回应称,实验设计存在缺陷、研究过程存在着不严谨的问题。
  韩春雨团队资料图
  前述人士告诉《中国科学报》:"这波之后,NgAgo这个研究方向在中国做得很慢。韩春雨他们的工作开展起来也比较困难,连学生也没有新招。"
  2019年4月4日,预印本网站BioRxiv刊登了一篇来自美国普渡大学研究人员的研究论文,表明NgAgo通过核酸内切酶活性介导增强大肠杆菌的同源重组。BioWorld第一时间解读并报道了该论文,该研究表明NgAgo可以编辑原核生物,但不能编辑真核生物基因组。
  2019年7月,韩春雨在预印本网站BioRxiv发表了一篇关于基因编辑的新论文:Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE,该研究开发了一种新型的活细胞RNA追踪成像工具——VN-dCasE-VC,效果和可用性更强。
  该论文署名单位为河北科技大学基因编辑研究中心,通讯作者为韩春雨,第一作者为高峰。
  最新进展
  2016年,韩春雨团队的成果一下子使NgAgo火遍全球,广大研究人员去验证其效果,很不幸,没有相关的团队能确定NgAgo有基因编辑的功能,随后引发广泛质疑及一系列的后续事件,如今有了最新进展:
  2021年9月3日,普渡大学Kevin V Solomon团队在Nucleic Acids Research(IF=16.97) 在线发表题为 "NgAgo possesses guided DNA nicking activity " 的研究论文。
  总的来说,该研究发现NgAgo 是一种新型 DNA 核酸内切酶,属于由特征 repA 结构域定义的未被识别的 pAgo 类。NgAgo 使用 PIWI 中保守的和新的未表征的 repA 结构域来切割 DNA。
  NgAgo的这种切割介导原核生物中的基因编辑作用。该研究工作建立了探索 NgAgo 活性(以及其他 pAgo 的活性)的创新方法,并确定了将其发展为下一代合成生物学工具的关键蛋白质特征。
  基因编辑是一种通过靶向修饰改造基因组的新技术。自发现以来,CRISPR/Cas9系统已成为基因组编辑库中最强大的工具之一。
  NgAgo 专门切割与向导互补的 DNA
  2021年7月23日,华中科技大学罗迪贤及南华大学胡政共同通讯在Molecular Biotechnology 在线发表题为"Identification of a Novel Cleavage Site and Confirmation of the Effectiveness of NgAgo Gene Editing on RNA Targets"的研究论文,该研究证实NgAgo在体外和体内可以进行RNA编辑。
  不过,其他团队有另外的发现:
  南通大学刘东团队在Cell Research 发表题为"NgAgo-based fabp11a gene knockdown causes eye developmental defects in zebrafish" 的研究论文,该研究发现gDNA / NgAgo可以与靶基因结合以阻断其转录,同时该研究也没有发现NgAgo具有基因编辑的能力。
  该研究重新表征NgAgo在原核生物中的功能。NgAgo 在非嗜盐宿主中表达不佳,即使在重折叠后,大多数蛋白质仍不溶且无活性。
  然而,该研究发现可溶性部分确实起到了切割 DNA 核酸内切酶的作用。
  NgAgo 与其他具有催化活性的 pAgo 共享规范域,但也包含以前无法识别的单链 DNA 结合域 (repA)。repA 和规范的 PIWI 结构域都参与了 NgAgo 的 DNA 切割活动。
  NgAgo 可以在大肠杆菌中和体外在指导序列 3" 末端外 1 nt 处切割靶向 DNA。该研究还发现,这些核酸内切酶活性对于大肠杆菌中增强的 NgAgo 引导的同源重组或基因编辑至关重要。
  总的来说,该研究结果证明了 NgAgo 在基因编辑方面的潜力,并为看似矛盾的报告提供了新的见解。

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