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Wnt1诱导分泌蛋白1在直肠癌中的表达及其临床意义

  毕业论文
  作者:田超周总光孟文建李立于永杨杨烈雒洪志周宾
  【摘要】目的定量检测Wnt1诱导分泌蛋白1(Wnt1inducedsecretedprotein1,WISP
  1)基因在人直肠癌及远端正常直肠组织中的表达,为进1步研究该基因功能提供线索。方法提取人直肠癌及癌旁正常直肠组织总RNA,采用实时RTPCR分析WISP1的表达,再对PCR结果进行分析。结果WISP1mRNA在直肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常直肠组织,差异有统计学意义(Plt;0。0
  5)。WISP1的表达与肿瘤的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等因素有相关性。结论WISP1基因的异常表达可能与直肠癌的发生、发展有关,有望成为直肠癌诊断预后的标志物和治疗的新靶点。
  【关键词】Wnt1诱导分泌蛋白1基因;直肠肿瘤;mRNA
  ExpressionofWnt1inducedsecretedprotein1inrectalcanceranditsclinicalsignificance
  【Abstract】ObjectiveToprovidebasisforfurtherstudyofWnt1inducedsecretedprotein1(WISP
  1)genebyquantitativelydetectingitsexpressioninrectalcancertissuesanddistalnormalrectaltissues。MethodsRealtimeRTPCRwasusedtodetecttheexpressionofWISP1mRNAin86samplesofrectalcancertissuesanddistalnormalrectaltissues。ResultsTheaveragelevelofWISP1mRNAexpressioninrectalcancertissueswas7。744timesthanthatinnormalrectaltissues,withstatisticalsignificance(Plt;0。0
  5)。ThelevelofWISP1mRNAexpressionwascorrelatedwithtumordifferentiation,Dukesstageandlymphnodemetastasis。ConclusionsTheabnormalexpressionofWISP1genemayplayanimportantroleinthecarcinogenesisanddevelopmentofrectalcancer。WISP1maybehelpfulforprognosticevaluationandgenetherapyinrectalcancer。
  【Keywords】Wnt1inducedsecretedprotein1gene;Rectalcaner;mRNA
  1材料与方法
  1。1标本取材
  收集4川大学华西医院普外科20032004年确诊的86例直肠癌患者资料,其中男44例,女42例。各病例分别取直肠癌组织以及相邻远端正常直肠黏膜组织。组织在离体30min内取材,并于液氮速冻置于70冰箱保存备用。所取标本均经病理检查证实。
  逆转录酶MMLV为Takara公司产品;Trizol试剂为Gibco公司产品;DEPC、DNase、RNase为Sigma公司产品;引物和探针由Takara公司合成。
  1。3总RNA提取及逆转录反应
  1。4实时RTPCR反应
  1。5扩增效率及产物分析
  1。6统计学分析
  用相对表达软件工具XL4对RTPCR结果进行分析,揭示直肠癌组织及正常直肠组织两组间WISP1的表达是否有差异。利用SPSS11。0软件包中Chi检验和秩和检验分析WISP1与临床病理指标之间的关系。Plt;0。05为差异有统计学意义。
  2结果
  2。1总RNA电泳检测及定量
  2。2RTPCR扩增效率和线性关系
  GAPDH及WISP1扩增效率分别是1。61及1。85。线性关系为r1。
  2。3WISP1基因在直肠组织中的表达
  86例直肠癌样本中有56例过度表达,其中有17例直肠癌中的表达是正常直肠组织的15倍,有5例是610倍,有34例是超过10倍。REST结果显示在直肠癌中WISP1的平均表达水平是正常直肠组织的7。744倍,两组表达量的差别有统计学意义(Plt;0。0
  5),说明WISP1基因在直肠癌中的表达上调。
  2。4WISP1基因水平与临床病理指标的关系
  它与直肠癌的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移有关,与年龄、性别及CEA等临床病理因素无明显相关性(表
  1)。表186例直肠癌患者Wnt1诱导分泌蛋白1表达水平与临床病理资料的关系(略)
  3讨论
  【参考文献】
  4PfafflMW,HorganGW,DempfleL。Relativeexpressionsoftwaretool(REST)forgroupwisecomparisonandstatisticalanalysisofrelativeexpressionresultsinrealtimePCR。NucleicAcidsRes,2002,30
  (9):e36。

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