农药残留检测步骤

　　一、农残检测仪（分光光度）使用方法
　　仪器准备：农残检测仪（分光光度）1台、蒸馏水510ml、缓冲液试剂1袋、胆碱酯酶试剂1瓶、显色剂试剂1瓶、底物试剂1瓶、用于浸泡的小塑料杯若干（数量为检测样品的数量）、大移液枪（2-10ml）1支、大移液管若干（数量为待测样品数量+1）、小移液枪（20-100μl）1支、小移液管3支。
　　1. 试剂的配置：
　　（1）缓冲液：将小袋装的缓冲液配置剂（白色粉末）均匀的洒在干燥的塑料瓶内，加入500ml的蒸馏水摇晃均匀，静置20-30min待其溶解之后方可使用。
　　（2）胆碱酯酶：使用大移液枪（2-10ml）吸取10ml缓冲液加入胆碱酯酶配制剂中摇晃均匀，静置20-30min之后方可使用。
　　（3）显色剂：使用大移液枪（2-10ml）吸取10ml缓冲液加入显色剂配制剂中摇晃均匀，静置20-30min之后方可使用。
　　（4）底物：使用大移液枪（2-10ml）吸取10ml蒸馏水加入底物配制剂中摇晃均匀，静置20-30min之后方可使用。
　　※蒸馏水的制作：将连接蒸馏水制作机器的水龙头打开至刻度后，检查排水管是否有液体流出，（如有水流，则进行下一步；如没有，则调整水流大小；如水压过小或不稳定则不建议在该时间段制作蒸馏水）打开下方黑色电源开关，设备便开始制水。
　　2. 农残检测操作流程：
　　（1） 取样：对于到货的果蔬进行随机取样。
　　（2） 化验：
　　1.将待测样品切取2-4g放置于小塑料罐中，并使用大移液枪（2-10ml）将10ml缓冲液加入该塑料罐中摇晃后静置2-3min。静置期间按照样品的摆放顺序将样品名称录入电脑表格。
　　2.使用大移液枪（2-10ml）将2.5ml缓冲液加入第一个试管之后，按照样品摆放的顺序依次将浸泡过样品的提取液加入后续的试管中。
　　※一种样品仅可使用一支试管，大移液枪需要搭配大移液管使用，一种样品也仅可使用一支移液管。
　　3.使用小移液枪（20-100μL）将100μL的胆碱酯酶与100μL的显色剂依次加入试管中并摇晃混匀。静置15-20min。
　　※小移液枪要搭配小移液管使用，加入胆碱酯酶与加入显色剂所使用的小移液管不能混用。
　　4.使用小移液枪（20-100μL）将100μL的底物加入每个试管中，经过摇晃后立即加入比色皿并放入农残检测仪当中。
　　5.点击农残检测仪显示的＂药残检测＂选项，勾选即将进行检测的通道序号后盖上盖子，点击＂检测＂便开始农残检测。得出数据后根据检测结果发票将数据录入电脑。
　　6.将登记好数据的农残检测结果单打印出来并附上检测员、当班主管及数据员的签名后将其与农残检测结果打印出的发票装订并存档。
　　※注意事项：
　　1.切割检测样品时应尽量取农药最有可能沾染的部位，取样重量宁愿取多不要取少。
　　2.正确的使用移液枪，移液枪要搭配合适的移液管使用，大移液枪只能用大移液管，小移液枪只能用小移液管，取液时要将移液枪按压至合适的位置，切勿按尽，否则吸取的液体将会增多，导致实验数据不准确。注射液体时要注意将按钮按尽，否则有可能会出现液体残留在移液管中的情况。
　　3.吸取液体时要注意移液管中是否有气泡，如出现有气泡的情况则需要进行重新吸取。
　　4.已经吸出来的液体不能再重新注射回试剂瓶中，否则将出现交叉污染的情况。
　　5.将试剂注入试管时要注意将液体直接注入到试管中的液面中，切勿注入到试管壁上。
　　6.冬季温度过低时，胆碱酯酶的活性会有所降低至无法检测的状态，因此需要水浴锅对检测的液体进行升温，提升的温度也不宜过高，约25-37℃之间，太高则会影响实验结果。
　　7.检测结果在某些时候会出现抑制率均为0%或是大部分数据均为0%的情况，此时需要注意标准吸光度是否已经过高（正常值约为0.3~0.8），如有过高的情况则需要对检测样品多检测几次；如无过高的情况，有可能时试剂或是机器引起的故障，建议对样品进行重新的检测。
　　8.显色剂、胆碱酯酶及底物这三种试剂应现配现用，如若需要保存这三种试剂，则需要将其保存于0~5℃的环境中。如长时间放置在常温的环境中，试剂有可能会出现失活的情况，导致检测数据异常。
　　9.在进行蒸馏水制作的或水浴锅开启时，必须至少有一人在化验室进行监管，防止发生危险事故。
　　10.使用过的比色皿、试管及塑料罐要进行及时的清洁，检测样品要保存冷库留样3天。
　　11.使用比色皿时要注意朝向，光滑玻璃面朝向自己放入仪器，使用时应触摸毛玻璃面而尽量避免触碰到光滑玻璃面，以免弄花玻璃面影响检测结果。
　　12.该方法检测农残易对某些样品检测出现假阳性（样品本身的某些物质对检测使用的胆碱酯酶产生干扰或抑制，导致本来农药没超标的样品检测结果的抑制率大于50%）的情况。出现假阳性的品类一般有：葱、姜、蒜、辣椒类、芹菜类、西红柿类、韭菜类。对于这类样品如若出现检测不合格的情况，则需要对其进行试纸仪器的复检。