【摘要】 最近在诱导多能干细胞 (iPSC) 3D 培养中出现的干细胞人工生态位工程为充分利用这些细胞在生物医学应用中的潜力提供了巨大的机会。 尽管完全化学定义的生态位环境可以为临床使用提供具有理想安全性的细胞，但在温和条件下为增殖细胞的受控释放建立人工可降解的生态位环境仍然是一个巨大的挑战。 最近， 柏林自由大学 李文忠博士 和Rainer Haag教授 团队通过物理-化学共凝胶策略，基于树枝状聚甘油和聚（N-异丙基丙烯酰胺）-共聚乙二醇聚合物，报道了一种先进的可控可释放 iPSC 3D 人工生态位 。受益于化学定义的合成材料及其通过共价交联和物理相变的精确配合，基于共凝胶的人工生态位系统可以通过最佳参数进行调整，并具有高细胞生物相容性，以支持高质量 iPSC 的稳健生产。优异的膨胀效率。此外，仅通过调节温度，扩增的细胞就可以可控地从它们的生态位环境中释放出来。总体而言，这种控释水凝胶支架在 iPSC 3D 培养的下游应用中显示出巨大的前景。相关论文以题为 Thermoresponsive Hydrogels as Microniches for Growth and Controlled Release of Induced Pluripotent Stem Cells 发表在《Advanced Functional Materials》上。 【主图导读】 图1 通过物理-化学共凝胶策略基于 dPG 和 pNIPAAm-co-PEG 聚合物构建的人工生态位的 iPSC 3D 培养工作机制示意图： 首先，一组合成前体，dPG-环辛炔，pNIPAAm-co-PEG 合成了叠氮化物和 RGD-环辛炔。1) 与这些前体一起，iPSCs 被播种到系统中，并且它们仅通过化学凝胶化初步产生了一个生态位。2) 转入 37°C 后，也发生物理凝胶化并形成可逆水凝胶。3) 在这些条件下，通过物理-化学共凝胶策略形成了一个稳定的生态位，支持 iPSCs 的生存和快速扩张。4) 培养一定时间后，再次将系统转至25℃，物理凝胶消失，生态位松动，细胞从生态位中释放出来。5) 通过离心收获细胞。 图2 前体的合成和水凝胶支架壁龛的制造过程： a) pNIPAAm-co-PEG-N3 的合成过程及其热可逆水凝胶特性。(NiPAAM:PEG-丙烯酸酯 = 5:1)。b) pNIPAAm-co-PEG-N3 的热可逆相变现象 (LCST ≈ 31 °C)。c) dPG-BCN (6%)、d) RGD-DIC 和e)最终形成的支架壁龛，在 37 °C 下（在 ESGRO 培养基内）具有 iPSCs 培养物。 图3 a) 测试具有可变体积比的dPG-BCN与pNIPAAm-co-PEG-N3（cpNIPAAm-co-PEG-N3 = 100 mg/mL）的预制水凝胶的弹性模量 G＂和粘性模量 G＂, cdPG-BCN = 100 mg mL-1) 在恒温 (37 °C) 下。b) 在一定比例 (1:1) 下具有四种不同前体浓度的系统的时间依赖性凝胶化测试。c）不同前体比例下水凝胶生态位的流变数据。d）在一定比例下具有各种前体浓度的水凝胶生态位（凝胶1-凝胶4）的流变学数据。e，f）不同温度下水凝胶生态位不同凝胶化机制的流变学贡献。 图7 基于 dPG-pNIPAAm-co-PEG 小众支架的 3D 培养系统在优化条件下支持 iPSCs 的扩展（比例尺 = 100 µm）。 a-c) 分别在第 1、3 和 4 天培养过程中的细胞活力和形态。d,e) 通过活/死染色监测第 1 天和第 3 天的细胞活力测试（绿色 = 活细胞，红色 = 死细胞）。f) iPSCs 在最佳条件下的增殖效率。 图8 从 dPG-pNIPAAm-co-PEG 共凝胶生态位培养系统中控制释放和收获扩增的 iPSC。 a) iPSCs 与前体混合并嵌入培养系统并培养一段时间。b) 用 PBS 代替培养基，将培养皿在 25°C ( 泡泡男孩隔离罩中生活12年，离世前，第一次触碰到妈妈憔悴年来甚，萧条益自伤世界上有许多怪异的病症，在目前的医学水平下，还是难以治愈许多奇病。部分病症需别人献血捐赠骨髓或内脏，才能让患者生存下去，有一种病症称作重症联合免疫缺失，这种病1985年，偶然发现秘密USA电台，周保中夫人查看后满眼热泪过零丁洋惶恐滩头说惶恐，零丁洋里叹零丁。人生自古谁无死？留取丹心照汗青。东北烈士纪念馆中收藏着一部上面标有USA字样的老旧无线数传电台，生锈的零件和破损的配套密码本能看出它所历经的北斗再立功！我国帮俄罗斯一大忙，美国十分眼红，印度却表示担忧秦朝年间，世间广为流传一诗歌，名为秦风无衣，其内容为与子同袍，与子同仇与子同泽与子偕作与子同裳，与子偕行与子同德，与子共赢。合作共赢，才实属上上策。中国在国际中的地位从古时起便有了古代帝王死后，殉葬嫔妃的双腿为何总是分开？死前经历了啥古代殉葬制度历来都是极其残酷的，也有不少人为之痛斥，先秦华夏族民歌国风秦风黄鸟就亦提到交交黄鸟，止于棘。谁从穆公？子车奄息。维此奄息，百夫之特。临其穴，惴惴其栗。彼苍者天，歼我良人美国蝙蝠侠女孩，整容7次去除脸上胎记，后来长成什么样了春秋时期百家争鸣，儒家文化也始于那个年代，而儒家的核心文化之一便是孝道，中国自古以来也是一个尊崇孝道的国家。孝经中写道身体发肤，受之父母，不敢毁伤，孝之始也，足以见得我国对于孝道的俗话说儿孙自有儿孙福，其实下句才是精华，老祖宗大智慧俗语常言合圣道，宜向其中细寻讨。中国历史源远流长，五千年的文明古国，交给我们很多经验和道理值得学习。比如增广贤文之中的许多词汇，对现代子女的三观具备教育含义。我们的先祖极具智慧，他喜马拉雅山发现鬼兰，值1600万，外形像青蛙个人不能买卖有时候，人们欣赏的不是眼前的美景，而是美景背后所蕴含的独特意义。周敦颐的一句予独爱莲之出淤泥而不染，濯清涟而不妖，中通外直，不蔓不枝，香远益清，亭亭净植，可远观而不可亵玩焉。看似赞AI技术复原古人相貌曹操的脸看后不适，楼兰美女像绝色女星南村辍耕录疑冢人言疑冢我不疑，我有一法君未知直须尽发疑冢七十二，必有一冢藏君尸。在漫长的历史长河中，华夏这片神奇的土地上，涌现了许多英雄人物。他们文韬武略，能常人所不能，留下了许多为什么如今无人敢惹中国？12年前的一场意外，无意间暴露出实力我国固有团结统一的优良传统，在吕氏春秋中有写到，万人操弓，共射一招，招无不中。国之兴亡与一国国民自身的素质息息相关，独木难成林，要想不任人宰割，便要团结一心。由于清政府的腐败无能，老蒋审视十大元帅名单，指着一个人对宋美龄感叹道此人太厉害有才气之人，不分时代。近代时期，有一智勇双全者，世人连连夸赞，平生事迹亦道不完，毕生所作诗篇更是流传至今，一首青松遍布于千家万户。大雪压青松，青松挺且直。要知松高洁，待到雪化时。做年至五十才明白走霉运之人，多是源于这两个毛病，戒掉一个也好孟论语中说吾十有五而志于学，三十而立，四十而不惑，五十而知天命，六十而耳顺，七十而从心所欲，不逾矩。易经不是一部简单的算命书，它是真正意义上最多样的哲学古典书籍。只有从生和生命两个 <<<<<<－>>>>>>
