液相干货提炼流动相的配制和使用
流动相的配制是我们日常实验最普通的一环,也是做实验的第一步,所以流动相配制的质量直接影响到实验的结果成功与否。如果配制不规范,就会造成像系统堵塞、压力波动、保留时间重复性差和鬼峰等诸多问题,就会耽误项目的进度。正确的超纯水及缓冲盐等容易受光照改变状态的流动相必须要使用棕色玻璃瓶存放,避免可能的长菌或析出。超纯水必须使用临用新制的水,防止使用的水内部已经有藻类生长。所有流动相必须过滤来避免可能的颗粒堵塞系统。对于乙腈这种长时间存放会生成络合物的特殊试剂,使用时尤其要注意它开瓶后的使用有效期,更换新的乙腈时要彻底清洗流动相瓶以避免可能出现的络合物残留,以防进入液相系统造成流量不准或压力波动。放流动相的玻璃瓶一定要使用随液相来的标配流动相瓶,质量和玻璃材质的稳定性才能保证,避免不稳定性的玻璃材质影响流动相的物理和化学特性。
规范的抽滤操作也很重要:首先抽滤瓶要干净。不干净的抽滤瓶会导致液相系统压力逐渐升高或鬼峰的出现,所以使用完成要及时清洗并晾干。其次是用于抽滤的膜要润洗。因为抽滤膜的生产和包装并非超净包装,表面会有残留的颗粒或碎屑,抽滤时要用少量流动相先润洗一下抽滤膜,达到清洗的目的。最后初滤液一定要弃去。初滤液也就是我们用来清洗抽滤膜和润洗抽滤瓶的少量流动相,这部分流动相受污染的可能性很大,一般要弃去。
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