液相色谱柱的结构,师傅级别的也要懂得
液相色谱柱
液相色谱柱的分离其作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是根据填料类型决定的。
正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3-10μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合— CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3-10μm之间。
一、色谱柱的安装:
a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
c、 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈,切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。
二、液相色谱柱的使用:
色谱柱在使用前,至好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是至佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理:
a、至好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制:
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:
a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,至好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择:
因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求至佳柱效,至好使用至佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。
当选用至佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
注意:
A、由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。
B、对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水至好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。
C、含水流动相至好在实验前配制,尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。至好加入叠氮化钠,防止细菌生长。
D、流动相要求使用0.45μm滤膜过滤,除去微粒杂质。
E、使用HPLC级溶剂配制流动相,使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命,提高柱性能。
现在应该知道液相色谱柱结构是什么了吧?
最白的白有多白把科学带回家关注风云之声提升思维层次导读有一个男人也一门心思追求着极致的白,经过他和团队六年多的努力,最近他终于做到了。阮修林教授举着他们实验室有记录以来最白的涂料粉刷样品。(图片来源普渡大学
为何是中国外交官,而不是学者媒体站在反击西方第一线?郑若麟关注风云之声提升思维层次导读我们深知,国家需要我们这种对外的声音,需要我们对国家的政策中国正在发生的事实以及有关中国的一切,向外用普通西方民众能够接受理解的方式进行述说解释。但是我
如何正确看待华人外籍科学家?科技袁人关注风云之声提升思维层次导读一位卓越的科学家至诚孝子和忠厚长者。视频链接抖音视频httpsv。douyin。comeg8FHKT本视频发布于2021年4月30日,点赞量已超3。7万
谢文颂射天狼制弹弓作传家宝?挽弓当挽强某日,于公园故枝堆里找见一树杈,观其形,可制作弹弓。犬子两眼放光。某家振作精神,有厨房刀具作锯,以掌增五泡之功,成其型弓架高约一尺有三,横阔约七寸余五,握把粗如鹅卵。拟以
谢文颂格局狭隘致理论物理陷入盲人摸象而不自知掌握宇宙探析理论物理趴窝龟缩的三大原因(之二)谢文颂格局狭隘致理论物理陷入盲人摸象而不自知论述这个题目就直接援引即将出版的我著写的人类基本认知原理之大统一理论中的两个段落科学的最重
谢文颂小学入学放弃西城,选择石景山望子成龙心切切今天(6月1日)下午四点,挂上电话,一场长达一年之久的包含着冷战热战及各种小动作的博弈终于画上了句号妻子同意撤销孩子在西城上小学的意愿,下周一去石景山教委补录登记信息
谢文颂量子纠缠就是万有引力效应的微观表现量子纠缠就是引力关联这几天,在今日头条知乎上,科学家首次实现宏观物体之间的量子纠缠闹得沸沸扬扬。该信息源于科学杂志上的刊文,据称科研人员已对实验结果实施了有效测量。一直以来,从科学
小课堂甲烷与全球变暖甲烷是当今社会重要的燃料与化工原料,而全球变暖是关乎人类存亡的巨大难题。二者究竟有何关联?为何越来越多的人呼吁减少甲烷排放?希望通过本期小课堂,你会了解更多全球变暖的秘密。视频加载
碳排放的社会成本它是什么?为什么要计算它?碳排放的社会成本,简称SCC,它是一项通过计算得出的重要指标,可以帮助我们衡量气候变化相关法规的效益。碳排放的社会成本可以帮助我们了解不同碳排放量的潜在后果。碳排放的社会成本有许多
从三体看硬核的科学部分,分析比邻星B有没有文明存在在拜读了刘慈欣先生的科幻小说三体后深受启发,出于从小对宇宙的好奇和向往,也打算凭自己对宇宙的理解结合一些天体物理学知识尝试着写一部关于比邻星的科幻题材小说。故事进行了4章,突然发现
烯烃生产技术取得新进展,新老工艺大回顾最近的一项研究显示,MTO(甲醇制烯烃)技术取得新进展!烯烃最早是从上世纪50年代开始生产的,在工业家用产品和服装行业有广泛应用。烯烃的使用量从60年代开始稳步增长,并且每年都会发