范文健康探索娱乐情感热点
投稿投诉
热点动态
科技财经
情感日志
励志美文
娱乐时尚
游戏搞笑
探索旅游
历史星座
健康养生
美丽育儿
范文作文
教案论文
国学影视

简单有效!把内含子引入Cas12a中,可增强基因编辑和基因靶向效率

  近日,Plant Biotechnology Journal在线发表德国卡尔斯鲁厄理工学院植物研究所团队题为"Enhancing gene editing and gene targeting efficiencies in Arabidopsis thaliana by using an intron-containing version of ttLbCas12a"的论文,该研究将10个拟南芥中的短内含子引入ttLbCas12a的编码序列中,构建了包含内含子的ttLbCas12a变体(ttLbCas12a-i),旨在增强基因编辑和基因靶向效率。
  研究人员将带有典型供体和受体位点(AGGT)的拟南芥基因中的短内含子以200-400nt的平均距离放置于ttLbCas12a的编码序列中。由于ttLbCas12a的大小比SpCas9小,有10个内含子被引入编码区,为了提高剪接效率,研究人员使用NetGene2内含子剪接位点预测软件对所得ttLbCas12a-i ORF进行优化。
  接着,研究人员选择ttLbCas12a编辑效率低的七个目标位点 ,以比较ttLbCas12a-i和ttLbCas12a的编辑效率。两个位点位于ECA3基因中,五个位点位于邻近着丝粒I、III和IV的异染色质、着丝粒周围DNA。研究人员用蘸花法将含有crRNA以及两个变体的T-DNA转入到拟南芥中,并将转基因植物在22°C下生长两周。发现ttLbCas12a-i在每个目标位点编辑效率显著超过了ttLbCas12a,对于ttLbCas12a编辑效率很低的三个目标位点,ttLbCas12a-i编辑效率是ttLbCas12a的3.0-6.8倍。总体而言,ttLbC as 12a-i的效率是ttLbCas12a的1.3倍至6.8倍。
  基于以上结果,研究人员在拟南芥中使用乙酰乳酸合成酶(ALS)选择系统来判断ttLbCas12a-i 是否能进一步提高GT效率, 发现,ttLbCas12a-i的总GT效率是与ttLbCas12a的2.7倍,ttLbCas12a只有不到三分之一的阳性单株的GT效率高于1%,而ttLbCas12a-i超过四分之三的阳性单株GT效率高于1%。因此,ttLbCas12a-i提高了拟南芥中的基因编辑效率和GT效率,使一些难以编辑的位点变得可编辑。
  图1 利用ttLbCas12a-i改进基因编辑和GT
  研究人员认为ttLbCas12a-i使一些难以编辑的位点变得可编辑是由于细胞中存在更大量的核酸酶。这种表达增强是不依赖于启动子的,可以使ttLbCas12a-i成为植物界的一种有价值的新工具,该工具在多基因编辑等方面是有发展前景的。此外,ttLbCas12a-i的使用还能提高对培养温度有要求的生物的基因编辑效率。
  原文链接
  https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/pbi.13964
  温馨提示:本文转自"iPlants",文章转载只为学术传播,无商业用途,版权归原作者所有,如涉及侵权问题,请联系我们,我们将及时修改或删除。

四川省第二大城市绵阳市的房价高不高?为什么?2019年绵阳房价很平稳,二手房均价在7600元至7800元之间小幅波动,与2016年初的房价相比绵阳的房价明显高了很多,当前绵阳市的人均GDP,人均可支配收入均不足于支撑现在的房喜欢榴莲,去泰国旅游几月份哪个城市比较合适?其实去泰国旅游,最好是在1到4月份,这几个季节泰国的天气是全年最凉爽的时候,室外气温多在30度左右,要是在6月份泰国的气温都40多度,真不是一般人能承受了的。去泰国旅游到处都可以买为什么上海作为全国最大的一线城市,大牌的科技公司还没深圳多?首先纠正一下,上海不是最大的一线城市,上海市总面积小于北京和广州,建成区面积也小于北京。至于为什么大牌科技公司没有深圳多,这属于关公门前耍大刀。上海虽是经济最强市,但也是经济最多元太原居住环境怎么样?全国居住环境最好的城市里面,毫无疑问应该有太原市一席,这里冬天无天寒地冻,最低温度在零下10左右,夏天最好,最热的时候不超过零上32,尤其是夜间温差大,凉快的很哪!睡个好觉是没问题上大学后发现身边的同学都很牛,要如何调节自己的自卑心态?在中学阶段,同学们学习成绩会有很大的差异。如果在班级中你的成绩特别优秀,你的心里会有非常优越的感觉,也有很骄傲的感觉,当你以这样的成绩考入大学后,在大学的班级里你就不是高高在上的优为啥我减脂减重10来天,肚子是没有了,但是体重由原来156斤,反倒变成160斤呢?健身者和普通人对身材的定义是完全不一样的。普通人会仅凭体重来判断一个人的胖瘦,而健身者会靠体脂秤上的体脂数据。我们要知道,决定一个人体重的是骨头器官水分肌肉脂肪等,如果一个人的肌肉海南哪里最适合气管炎老年人居住?下面是我的亲身体会我爸老年痴呆,老母不肯放下老爸,不肯过冬来海南。三年前冬季在老家肺心病差点息火,送重症室抢救一个星期。春节初二我从海南赶回老家。第二年老爸去逝,我带老母来海南陵水为什么蔡崇信一点蚂蚁股份都没有?有句话是大隐隐于朝,中隐隐于市,小隐隐于野。蔡崇信,当年加入阿里巴巴的时候,没有自己投资马云团队而是选择撮合孙正义投资,虽然不是十八罗汉之一,但在阿里巴巴的位置,能排号第二,甚至从月薪4500,想买一款1万2左右的摩托车,外观要好看的,有哪些可以推荐?我是骠骑府!资深摩托车媒体编辑,评论员!月薪4500,买一辆12000左右的摩托车应该不算很败家的行为,骠骑府见过几位工薪族买的还是进口大贸车型,所以,这问题不是买不买得起,而是舍艾灸是骗局吗?艾灸他肯定不是一个骗局,中医里有很多病都是用艾灸去治疗的。艾灸多数是起了一个活血化瘀的作用。说个事儿,我的一个亲戚做微商呢,卖那种小的艾灸。150块钱一盒,我在某宝和某东上,搜了一14岁乳头内陷怎么办?14岁乳头内陷怎么办14岁乳头内陷多为先天性,通常采用手法牵引负压球吸引及器械持续吸引等非手术治疗方法,也可能是乳头乳房感染外伤肿瘤等所致的继发性畸形,需要明确原因后确定治疗方法。
种植国家队,苏垦农发农垦加工一体化航母,纵横发展有道(报告出品方分析师东方证券张斌梅)苏垦农发一体化发展的农垦龙头江苏省农垦农业发展股份有限公司是江苏农垦于十二五开局之年,实施农业资源战略重组,按照现代企业制度建立的全新农业企业。公酒店业复苏观察下沉市场休闲客率先恢复,龙头迎来整合良机随着国内疫情防控措施调整,承压3年的旅游酒店业迎来曙光。作为受新冠疫情冲击最直接的行业之一,中国酒店业近3年经历了怎样的变革?随着出行限制取消,酒店业将如何告别寒冬走向复苏?后疫情2022年滇企凭RCEP原产地证书获减关税超2400万元图为昆明海关关员为企业签发RCEP原产地证书杨慧梅摄中新网昆明1月16日电(刘俊辰王丽君张金蕾)记者15日从昆明海关获悉,2022年其共为云南省出口企业签发区域全面经济伙伴关系协定交互体验比固态按钮更丰富,苹果获得非显示输入区域技术专利IT之家1月16日消息,郭明錤早在去年10月就在推文中表示,苹果正在为iPhone开发全新的固态音量电源按钮,以取代现有的物理机械按钮。根据美国商标和专利局(USPTO)更新的专利电子行业资金流入榜韦尔股份等8股净流入资金超亿元沪指1月16日上涨1。01,申万所属行业中,今日上涨的有28个,涨幅居前的行业为计算机家用电器,涨幅为2。542。43。电子行业今日上涨2。26。跌幅居前的行业为煤炭汽车传媒,跌幅天津楼市成交量,创近14年新低!2022年的楼市,一片哀嚎。全国都一副熊样。天津也不例外。甚至诞生了不少历史罕见的极值现象。以致于救市的尺度越来越大。若用四个字概括刚过去的这一年的天津新房市场,那就是量跌价涨!量财报前瞻消费者贷款业务亏损高盛(GS。US)Q4利润预计将暴跌智通财经APP获悉,高盛(GS。US)将在周二股市开盘前发布第四季度财报,资产管理业务重新燃起了市场热情。这家华尔街巨头正在放弃以消费者为中心的增长战略,该战略已使其蒙受了数十亿美今年以来新股发行募资86。70亿元,科创板占比16。912只新股今日发行,保丽洁发行955。07万股,发行价7。95元,募资金额0。76亿元信达证券发行3。24亿股,发行价8。25元,募资金额26。75亿元。证券时报数据宝统计显示,以发A股三大指数涨逾1成交超九千亿元,北向资金净流入逾158亿沪指时隔1年重新站上年线重返3200点之上,两市成交放大至9000亿元之上。虽然午后回调,但北向资金无视回调,坚决单边净买入超158亿元。A股三大股指1月16日开盘涨跌互现。早盘两墨西哥外交部长宝马计划在墨西哥进行重大投资出品搜狐汽车据路透社报道称,墨西哥外交部长MarceloEbrard在1月13日表示,德国汽车制造商宝马正计划在墨西哥中部的圣路易斯波托西州进行一项新的重大投资,此前宝马已经在该州中国人的幸福感和矛盾的解决中国人的幸福感来源于1对世界的无知2对他人苦难的冷漠3对公共利益的不关心4对权力和金钱的膜拜5鼠目寸光,得过且过6精神胜利,苦中作乐!中国的矛盾用四个字就可以平息中国的矛盾用四个字