化妆品功效以及分析
化妆品功效评价方法具有多样性和复杂性,常见的评价方法为体外试验和人体试验两类,体外试验包括理化分析法、生物化学方法、细胞生物学方法、分子生物学方法等。
化妆品保湿功效的体外评价方法包括理化分析法、细胞生物法(包括三维重组皮肤模型法)。理化分析法采用称重法评判化妆品的吸湿性和保湿性,或对化妆品中的保湿活性成分进行定量分析。细胞生物法则通过研究化妆品对细胞中保湿相关基因(如丝聚蛋白、透明质酸合成酶)表达情况的影响进行评价。
保湿功效的人体评价方法主要测量皮肤角质层含水量,测量方法包括间接法和直接法。间接法通过电容、电导、电阻间接反映皮肤角质层水分含量。直接法的测量仪器有核磁共振光谱仪、衰减全反射-傅立叶和变换红外光谱仪、近红外光谱仪等;也可通过测量经表皮水分流失率反映皮肤屏障的锁水功能;还可结合皮肤表观特征评价化妆品的保湿功效,例如用图像分析法定量分析皮肤脱屑程度。
化妆品舒缓功效主要针对因皮肤屏障受损、神经功能异常、炎症反应等引起的皮肤灼热、刺痛、瘙痒,紧绷感、红斑、鳞屑、发红(毛细血管扩张)等症状,通过皮肤角质层取样法、液相色谱法、电离喷雾质谱法、串联质谱法等理化分析法对化妆品中有关活性成分进行定量分析。生物化学方法主要有透明质酸酶抑制实验、自由基清除实验、红细胞溶血实验、直接肽链反应分析实验等。细胞生物学方法主要是通过研究化妆品对细胞内神经受体、炎症因子的抑制作用来评价化妆品的舒缓效果。人体试验的仪器检测指标有皮肤水分流失率、皮肤红斑指数、皮肤水分含量、皮肤表面酸碱度等。
化妆品美白祛斑功效体外评价试验,主要看对抑制黑色素生成过程中所需各种酶、抑制黑色素颗粒转移至角质形成细胞、加速角质形成细胞中黑色素向角质层转移、还原淡化已合成的黑色素、抑制多巴的自身氧化、刺激细胞产生溶酶体吞噬黑色素等方面的影响。人体试验最初主要依据肤色相关指标的变化,例如国际照明委员会规定的相关参数。随着研究的深入,皮肤黑色素和血红素指标逐渐被认可,图像分析法也被广泛应用于化妆品祛斑功效测试中,即给皮肤色斑区域拍照,使用软件对皮肤色斑进行定量分析,常用仪器有面部图像分析仪等。
化妆品抗皱功效的体外评价方法包含生物化学法、细胞实验法。生物化学法包括清除自由基实验、超氧阴离子自由基实验、羟自由基实验、氧自由基吸附能力实验、抑制金属蛋白酶和弹性蛋白酶实验。在化妆品抗皱细胞实验中,通常使用人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞或三维重组皮肤模型,研究化妆品(成分)对细胞的生长增殖的影响。人体试验可采用评价皮肤表观形态的图像分析法,也可借助超声波技术及光学仪器。
现在化妆品临床检测逐渐从表观形态变为研究产品使用前后皮肤深层结构的变化,探究化妆品在不同皮层的作用机理,例如使用高频超声波测试仪测量皮肤真皮层厚度、致密度,或利用共聚焦激光扫描显微镜、双光子激光扫描显微镜、核磁共振成像技术、光学相关断层成像技术观察并拍摄不同皮层的微观结构。其中双光子激光扫描显微镜可同时分析胶原和弹性蛋白含量;还可结合皮肤弹性指标对抗皱功效进行综合评估。
化妆品祛痘功效可通过皮肤科医生评估和仪器检测两种方式综合评价。皮肤科医生多采用《中国痤疮治疗指南》中痤疮分级方法,给化妆品使用前后受试者皮损状态评分,从而评价化妆品的祛痘效果。关于痘的产生机制,虽然学术上没有统一认知,但目前行业普遍认为与皮脂过度分泌有密切关系,痤疮丙酸杆菌等毛囊微生物也参与了痘的形成过程。因此,在化妆品祛痘功效的评价中,除了对痘状态的图像学研究和通过多普勒血流仪对痘区域血流灌注量进行测试外,化妆品使用前后的控油效果也可作为辅助指标,还可结合化妆品对痤疮丙酸杆菌等毛囊微生物的抑菌实验结果,全面验证化妆品的祛痘功效。
一、随机原则
随机原则贯穿整个实验设计和实施的全过程,在化妆品人体功效评价实验中主要体现在以下3个方面:1在抽样时必须做到使人群中任何一个个体都有同等的机会被抽取成为受试者,以保证受试者的代表性;2受试者中任何一个个体都有同等机会被分配到任何一个处理组中去,以保证各组间的可比性,即非处理因素在各组的分布保持一致;3受试者中的任何一个个体先后接受处理的机会相同。
二、对照原则
在人体功效评价研究中,要想得出化妆品的效果是不是好,必须进行比较,有比较才有鉴别,而设立对照是进行比较的基础。由于在一个研究中影响实验结果的非实验因素很多,为了确定研究者关注的实验因素的效果,只有通过对照的方法,设立相对于实验组的对照组,使两组在除实验因素外的其余因素处于相同状态,非实验作用相互抵消,那么组间结局指标之差才能真实反映实验因素的作用大小。
某些皮肤状况会自然缓解,比如痤疮、晒后皮肤变黑等,只有设立对照才能判断出化妆品的使用与自然转归之间的关系。对照的作用就是提高实验的鉴别能力,使结论更具有说服力。
三、重复原则
重复是指实验组和对照组的受试者应具有一定的数量,也就是要求有一定的样本含量。由于试验的个体差异、操作差异以及其他影响因素的存在,同一种实验因素对不同的受试对象所产生的效果有差异。
通过一定数量的重复实验,该实验因素的真实效应就会比较确定的显现出来,可以从统计学上对其进行判断。"重复"在化妆品人体功效评价中通常有两层含义,即重复取样和重复测量。
重复取样就是同一时间在同一受试者身上测量某客观指标时,反复检测若干次,以排除操作方法产生的误差。重复测量就是受试者按时间顺序做多次观察,每隔一段时间测量一次指标,其目的是观察客观指标随时间推移的动态变化情况。
四、盲法原则
化妆品人体功效评价研究信息的真实性很容易受到研究对象和研究者主观因素的影响,这种影响可产生于实验设计阶段,也可来自资料收集或分析阶段。为了克服这种可能来自研究者或受试者的主观因素所导致的偏倚,可采用盲法。盲法是一种避免知晓研究对象获得何种处理的策略,就是在化妆品使用和随访期间,保密每一个受试者的分组信息,使参与研究的人员,包括研究对象、观察者或结局评估者、资料收集人员和统计分析人员。
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