血型鉴定和交叉配血技术的进展

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　　输血前试验包括血型鉴定、抗体筛选和交叉配血，其中交叉配血是关键〔1〕。交叉配血是在血型鉴定的基础上，进一步证实血型测定是否有误，以及受血者和供血者之间是否存在血型不合的抗原抗体反应，以保证受血者的输血安全。这一试验对于未进行红细胞血型抗体筛选的患者尤为重要，红细胞血型抗体有完全抗体和不完全抗体。完全抗体为分子量较大的IgM抗体，可在盐水介质的交叉配血中与相应的红细胞发生凝集反应；不完全抗体指ABO系统以外的其他血型抗体，为分子量较小的IgG抗体，在盐水介质中虽然能够结合红细胞上的抗原，但不能使红细胞凝集，必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集。根据红细胞血型抗体的特性，血型鉴定和交叉配血方法在不断产生，其检测技术也在不断发展。
　　1盐水交叉配血法
　　盐水法配血时，用生理盐水配制红细胞悬液，红细胞膜上由于唾液酸中的羧基离子而带负电，此负电荷形成的排斥力（Zeta电位）使单个红细胞之间保持一定的距离，当其与血清相配合时，血清中的大分子完全抗体，能在相应红细胞之间搭桥，使其发生凝集，通过观察凝集或溶血来判断配血结果。盐水法是交叉配血的必做项目，能简便快速的检测IgM型抗体，发现血型是否错误或判断是否发生溶血，但不能检出不完全IgG型抗体〔2，3〕，不能有效的防止免疫性溶血性和非溶血性输血反应的发生，因此单用盐水法配血存在一定的危险性。
　　2抗人球蛋白交叉配血法（AGT）
　　1908年CarloMoreschi利用分子搭桥的原理记录了抗人球蛋白试验。此法又称Coombs试验，分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验，是最经典、最早用于检查不完全抗体的方法，是目前交叉配血的金标准。本法灵敏，但是传统的抗人球方法，操作繁杂、反应时间较长、结果不易判断和统一、试剂效期短，不能满足输血检测及时准确的要求，因而未被国内广泛采用。
　　3酶介质交叉配血法
　　酶法是采用蛋白水解酶（如菠萝酶、木瓜酶等）进行配血的方法。酶可以破坏红细胞表面带电荷的唾液酸，从而降低红细胞表面电荷，使其得以靠拢，因而能使具有特异性的不完全抗体与经酶处理的具有相应抗原红细胞发生凝集。此法的特点是操作较为简便，经济，但较难质控，时间长，实验重复性较差，而且酶可能部分的改变红细胞结构，使某些隐蔽的抗原得以暴露，容易产生假阳性；有的抗原经过消化后便消失活力，真阳性变成假阴性。因此，此法也有一定的局限性。
　　4凝聚胺交叉配血法（MPT）
　　5微柱凝胶交叉配血法（MGT）
　　又称微管（板）凝胶抗球蛋白试验。1988年发明的微柱凝胶配血法使抗人球蛋白应用于输血常规检测成为现实，它保持了传统抗球蛋白试验的准确性，而且方法简单，易于批量操作〔10〕，是新发展的一项免疫学检测技术。此法可在全自动血型分析仪上进行，成为国际安全输血检查的推荐方法，目前国外已广泛应用〔11〕。
　　6现状及措施
　　随着临床输血技术的快速发展，血型鉴定和交叉配血方法不断的更新和完善，很好的保证了病人的输血安全。但在一些基层医院由于信息沟通不够，技术还很原始，血型鉴定和交叉配血方法仍停留在盐水法。由于盐水配血法只能检测出不相合的完全抗体，因此除盐水法外，还需要应用其它的配血方法来检测是否存在不完成抗体，以避免不完全抗体造成的输血反应。由于传统抗人球蛋白法、酶法本身的局限以及微柱凝胶法仪器昂贵、试剂成本高，目前大多数的基层医院，在未能常规开展红细胞不完全抗体筛查情况下，只能采用盐水法加凝聚胺配血法来进行输血前配血试验。
　　段慧玲等〔14〕报道，几种交叉配血方法的灵敏度依次为：微柱凝胶法gt；凝聚胺法gt；盐水法。目前，国外基本采用微柱凝胶法，国内也正在普及。何子毅〔15〕、罗志〔16〕的研究表明，微柱凝胶法、抗人球蛋白法和凝聚胺法用于交叉配血检测IgG型抗体，如果超出其最低检测限，均存在阳性漏检的现象。因此我们建议在日常交叉配血工作中，采用多种方法同时做交叉配血试验，以防止供受血者血液中存在的效价较低、或效价较低、亲合力也较低的IgG抗体漏检。此外，有些交叉配血试验，由于受到过高量的球蛋白的影响，试验结果也可出现假阳性，此时应对结果做进一步鉴定，以确保交叉配血结果的准确性。
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