市区农贸市场中大豆的检测

　　市区农贸市场中大豆的检测市区农贸市场中大豆的检测市区农贸市场中大豆的检测
　　1材料与方法2结果与分析3结论与讨论
　　东北是我国大豆的主产区，然而受地理位置的约束及产量不稳定等因素的影响，每年国内的大豆产需出现严重的不均衡，与此同时，由于国外转基因大豆存在成本低，出油率高等优势，对国内的大豆种植市场产生严重冲击〔67〕，因此中国每年从国外进口大量的转基因大豆，国内90以上大豆油源于进口转基因大豆〔9〕。进口转基因大豆一般只用于油料的生产，但其一旦流入种子市场将会对国内传统大豆造成基因污染〔10〕。
　　因此本实验对广州市农贸市场中是否存在转基因大豆进行初步筛查。目前转基因食品的检测方法主要有2种〔2〕，一是针对转基因食品中外源基因的表达产物蛋白质的检测，如酶联免疫吸附法、蛋白质印记法、侧流型免疫测定法，二是针对转基因食品中的外源DNA的检测，如DNA的定性、定量PCR法检测。
　　相比于蛋白的检测，基于DNA的检测方法灵敏度更高，应用也更加广泛，因此本实验采用定性PCR的方法对收集的样品进行检测。大豆中蛋白含量比普通植物材料高，本实验中采用行标的方法对大豆基因组进行抽提，通过两步蛋白抽提，充分去除DNA中的蛋白质。
　　结果发现最终提取的基因组DNA条带清晰单一，OD260OD280均为1。61。9，纯度较高，无蛋白质和RNA污染。大豆凝集素Lectin基因是大豆特有的内源基因，常作为PCR检测的内参基因，本实验中以之为靶基因进行PCR检测，在转基因阳性和阴性样品以及14份未知样品中都检测到Lectin条带，表明通过改进的方法提取的大豆基因组DNA的纯度较高，可用于PCR检测，且最终的PCR反应体系和条件也满足PCR反应要求。
　　采用3对外源基因引物进行外源基因的检测，分别扩增调控元件CaMV35S、NOS以及功能元件EPSPS基因，由于西兰花、卷心菜、花椰菜、甘蓝等十字花科植物在自然条件下很容易感染花椰菜花叶病毒（CaMV），因此在大豆DNA中检测到CaMV35S不能确定其为转基因大豆〔11〕，而另外一个筛选基因为NOS终止子，NOS终止子一般只存在于用于转化植物使用的农杆菌中，其检测阳性不能确定是转基因大豆。当某样品检测到CaMV35S启动子和NOS终止子皆为阳性时，便可以初步判定为转基因作物，而对功能元件EPSPS等基因作为植物转化所转入的目的外源基因，对其检测可与CaMV35S、NOS的检测结果共同作为转基因大豆检测的标准，当对样品进行检测的3个外源基因皆为阳性时即可确认该样品为转基因大豆。
　　本实验从广州农贸市场中收集了14份大豆，经检测有1份样品为转基因大豆，说明转基因大豆已进入流通领域和日常食品生产中，未达到有效的监管。我国目前并没有批准转基因大豆种子的种植和生产，在广州市场上转基因大豆不仅没有按要求进行转基因标识，也没有合法来源，违反了国家关于转基因种子生产和销售的相关法律法规，其非法流通和违规种植就可能对国内的传统大豆造成污染，影响我国的大豆种植安全并可能对物种多样性造成严重威胁，需要引起有关部门和研究机构的关注。