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谈虎杖提取物对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

  肝损伤是临床常见的危害人类健康的疾病。现代医学并无治疗肝损伤的特异性药物,多采用休息、加强营养、补充维生素和对症治疗等,严重者需被迫终止用药,以免加重肝损伤。中医药经过几千年的发展研究,对肝损伤有一定的促再生和修复作用,因此运用中医药综合治疗作用,来减轻或控制非暴力性肝损伤的发生,应当是一种既有效而又切实可行的治疗思路。本实验采用中药虎杖来研究对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。
  虎杖为蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb。etZucc。,的干燥根茎和根。《本草述》记载:虎杖之主治,其行血似与天名精类,其疗风似与王不留行类,第前哲多谓其最解暑毒,是则从血所生化之原以除结热,故手厥阴之血脏与足厥阴之风脏,其治如鼓应桴也。方书用以疗痉病者,同于诸清热之味,以其功用为切耳,然于他证用之亦鲜,何哉?方书用以治淋,即丹溪疗老人气血受伤之淋,亦以为要药,于补剂中用之矣。谓虚人服之有损者,与补剂并行,其庶几乎。主治功效一般认为是:活血散痰、祛风解毒、消炎止痛、去湿热黄疸、治慢性气管炎、降低血脂等功效。现代药理学研究虎杖浓缩片发现其具有保护肝组织的作用。本实验采用虎杖提取物对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用进行了观察。
  1材料与方法
  1。1动物
  健康清洁级雄性ICR小鼠(1820g)由浙江省医学科学院动物中心提供(动物合格证号:2001001)。
  1。2虎杖提取物的制备
  虎杖加8倍量水,回流提取3次,每次1h,合并,抽滤,浓缩至含生药0。5gmL1。
  1。3试剂与仪器
  1。3。1试剂:CCl4分析纯,用时以橄榄油配成0。2溶液。ALT、AST、MDA、SOD、考马斯亮蓝试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。
  1。3。2仪器:电子天平:AB104N型,瑞士METTLERTOLEDO公司,离心机:802B型,上海安亭科学仪器厂,半自动生化仪:738PLUS型,上海安泰分析仪器有限公司。
  1。4实验方法
  取60只雄性ICR小鼠随机分成六组,每组10只,分为正常组、模型组、阳性药组、虎杖提取物高、中、低剂量组。正常组及模型组给予生理盐水,阳性组给予联苯双酯200mgkg1,虎杖提取物高剂量、中剂量、低剂量,灌胃给药,每天1次,连续7d。于末次给药1h后,正常组给予腹腔注射生理盐水,其余组给予腹腔注射0。2CCl4溶液10mLkg1。12h后摘眼球取全血,取肝脏。
  1。5指标测定
  1。5。1血清AST、ALT测定:全血离心后,取上清液,按照试剂盒进行测定。
  1。5。2肝脏MDA、SOD的测定:称取肝脏0。20。4g,加冷生理盐水9倍,匀浆,离心后去上清液,按试剂盒说明书进行测试,同时采用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。
  1。6统计学处理
  数据以xs表示,用ttest检验差异的显著性。
  2结果
  2。1虎杖提取物对CCl4急性肝损伤小鼠血清ALT,AST的影响与正常组比较,CCl4急性肝损伤小鼠血清ALT,AST显著的升高(P给予虎杖提取物后,AST、ALT均显著性下降,尤其是高剂量组与中剂量组与阳性药相似,具有较强的降低作用。
  2。2虎杖提取物对CCl4急性肝损伤小鼠肝组织SOD活性、MDA含量的影响与正常组比较,CCl4急性肝损伤小鼠肝组织SOD活性显著降低,MDA含量明显上升(P给予虎杖提取物后,肝组织SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,尤其是高剂量组与中剂量组与阳性药相似,具有较强的降低作用(P0。01)。
  3讨论
  化学性肝损伤模型是目前国际上常用的肝损伤模型,具有操作简便、病理模拟性及重复性好等优点。四氯化碳是经典的化学性肝损伤的毒剂,被广泛应用于肝坏死及肝损伤的研究。目前,CCl4是一种有毒环境生物损害剂,在肝氧化代谢中可产生三氯甲基自由基,继而攻击脂质细胞膜。造成肝细胞脂质过氧化性损伤,本实验中给小鼠腹腔注射0。2CCl4溶液10mLkg1,引起小鼠血清中ALT、AST活力及肝组织中MDA含量增高,而SOD活力明显下降,由此可进一步说明CCl4引起肝损伤的机制与脂质过氧化有关。中药中能预防肝损伤的很多,陈红艳等研究发现甘草提取物能明显降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,降低肝匀浆中MDA含量,提高SOD活性。喻宁华等研究发现仙人掌多糖可显著地抑制CCl4引起的小鼠血清ALT、AST活性升高,改善肝中毒小鼠GsH含量及GsT活性和GsHPx活性水平,并减轻肝组织的病理变化。韩再刚等研究发现地丁草水提取物能显著降低CC14所致小鼠血清AIJrr(P0。01)和AST活性(P0。05),升高肝组织SOD活性(P0。01),降低肝组织MDA的含量(P0。01)。表明地丁草水提取物对CC14所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。本实验采用虎杖提取物来研究其保护对CC14所致小鼠急性肝损伤。

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