高效液相色谱法测定保元胶囊中丹酚酸B的含量

　　保元胶囊原标准收载于苏制字所附质量标准，由熟附片、肉桂、仙灵脾、熟地、丹参、川芎、红参、大黄酚8种组分。其功能主治为温阳补肾、活血泄浊。用于慢性肾衰竭属阳虚型及血透，患者减少血透次数。笔者通过高效液相色谱法法测定保元胶囊中的丹酚酸B的含量，完善了和提高了该制剂质量标准。
　　1仪器与试药
　　1。1仪器
　　安捷伦（Agilent1100）高效液相色谱仪，G1314AVWD检测器（美国安捷伦公司）；SK250LH超声波清洗器上海科导超声仪器有限公司）；BP211D型电子天平（赛多利士）。
　　1。2试药
　　丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所111562201009）；甲醇、乙腈均为色谱纯；其余为分析纯；水为纯化水；保元胶囊（镇江市XXX医院，批号：111103，100403，101222。）
　　2方法学考察
　　2。1色谱条件
　　色谱柱：AngilentC18柱（250mm4。6mm，5流动相：甲醇乙腈甲酸水（30：10：1：59）；流速：1。0mlmin；柱温：30；进样量：10检测波长286nm；理论塔板数为6647。
　　2。2溶液制备
　　2。2。1对照品溶液的制备
　　精密称取丹酚酸B对照品10。28mg置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品储备液（每1ml含丹酚酸B102。80g）。再精密量取对照品储备液3ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得丹酚酸B对照品溶液（每1ml含丹酚酸B30。84g）。
　　2。2。2样品溶液的制备
　　取本品10粒内容物，精密称定，研细，取约0。5g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入75甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷再称定重量，用75甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
　　2。3方法学考察
　　2。3。1专属性考察
　　按标准处方量及制法制得不含丹参的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液与阴性对照溶液各10l，进样测定，阴性对照溶液在与对照品溶液色谱峰相应位置上无色谱峰出现，表明阴性对照溶液对测定结果无干扰，方法专属性良好。
　　2。3。2线性关系精密量取丹酚酸B对照品储备液（102。80gml1）1。0ml、2。0ml、3。0ml、4。0ml、5。0ml、6。0ml分别于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下进样分析，以峰面积（A）为纵坐标，相应浓度（C）为横坐标进行线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为A10。3125C0。2602（R0。9999），线性范围10。2861。68gmL1，结果表明峰面积与浓度呈良好的线性关系。
　　2。3。3稳定性试验
　　在本试验条件下，样品溶液室温放置10h，每隔2h时进样10l，记录峰面积，RSD为0。9。表明供试品溶液10h内稳定。
　　2。3。4精密度试验
　　取同一对照品溶液，依法操作，连续进样5次，每次10l。结果丹酚酸B对照品峰面积的RSD为0。5（n5），表明精密度良好。
　　2。3。5重复性试验
　　取本品1批，照样品测定法测定5份，测定丹酚酸B的含量，其平均含量为0。62mg粒，RS为0。2。
　　2。3。6加样回收率试验
　　取6份已知含量的样品（批号为111103），精密称取，置具塞的锥形瓶中，精密加入丹酚酸B对照品适量（每个浓度各2份），依次加入6份样品中，按供试品溶液制备方法制备溶液，进样测定，计算回收率。
　　3结论
　　3。1供试品溶液制备方法中，我们对比了不同溶媒不同的提取方法进行了比较，发现超声提取时，计算结果含量偏低，表明提取不完全；75乙醇回流提取方法较理想。测定结果表明上述方法提取完全，杂质较少。
　　3。2采用HPLC法测定保元胶囊中的丹酚酸B的含量，该方法简便、准确、重复性好，不同批次的保元胶囊测定结果表明，丹酚酸B含量稳定，该方法可用于保元胶囊的含量测定。