HPLC法测定益肾胶囊中马钱苷的含量

　　益肾胶囊原标准收载于苏药制Z04002040所附质量标准，由知母、萸肉、丹参、黄柏、生地、白花蛇舌草等14味中药制成。功能主治：解毒活血、滋阴清热。用途：用于肾炎、肾病综合症属阴虚内热型，拮抗激素引起的阴虚内热等症。萸肉实为山茱萸科植物，山茱萸（CornusofficinalisSieb。etZuce）的成熟果肉（干燥），其有效成分为马钱苷。通过高效液相色谱法测定益肾胶囊中萸肉成分的含量，提高了该制剂质量标准，该方法较简便、快捷，稳定性及重现性好。
　　1仪器与试药
　　1。1仪器
　　安捷伦1260高效液相色谱仪，G1314BVWD检测器（美国Agilent公司）；METTLEDOTOLEDO电子天平（梅特勒）；紫分光光度计（日本岛津）。
　　1。2试药
　　氧化二磷减压干燥12小时后使用；乙腈为色谱纯；水为纯化水；益肾胶囊（镇江市丹徒区中医院；批号：140218，130122，130516）
　　2实验方法
　　2。1色谱条件
　　色谱柱：安捷伦C18柱（150mm4。6mm，5m），流动相：乙腈水（14：86），检测波长238nm，柱温：30，流速：1。0mLmin，进样量：10l，理论塔板数4168。
　　2。2溶液的制备
　　称取马钱苷对照品10。42mg，置100ml容量瓶中，加80甲醇振摇使其溶解，加80甲醇稀释至刻度，摇匀，制成对照品贮备溶液（每1ml溶液中含马钱苷103。37g）。再精密量取储备溶液2ml，置10ml容量瓶中，加80甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。取本品10粒内容物，精密称定，4。2752g，混均，研细，称取供试品1。0232g，置20ml容量瓶中，加80甲醇约15ml，超声处理（功率250W，频率40KHZ）30分钟，放冷，用80甲醇溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
　　2。3标准曲线
　　精密量取马钱苷对照品贮备液0。5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别置于10ml容量瓶中，加80甲醇稀释定容至刻度，摇匀，在上述色谱条件下进样分析，以浓度（x）为横坐标，相应峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为y10。336x0。00342（R0。9999），线性范围5。1751。68gml，结果表明线性关系良好。
　　2。4重复性
　　精密称取批号为140218样品6份，按照样品含量测定项下方法测定，测得结果，计算出马钱苷的量，其平均含量为0。12mg粒，RSD为0。5。
　　2。5精密度测定
　　取马钱苷对照品溶液，进样6次，每次10l，记录峰面积，其相对平均偏差（RSD）为0。8。
　　2。6稳定性
　　取供试品溶液适量，室温放置12小时，在本试验条件下，每隔2小时间隔，进样10l，记录峰面积，计算结果，RSD为0。9。结果表明该方法稳定性好，供试品溶液12小时内较稳定。
　　2。7回收率
　　取6份已知含量的益肾胶囊样品（批号为140218），精密称取本品内容物0。5g，分别置于20ml的容量瓶中，依次精密加入马钱苷对照品贮备液1ml，1ml，1。5ml，1。5ml，1。8ml，1。8ml，照样品溶液的制备，并进行测定马钱苷的量，平均回收率为99。88，RSD为0。4。
　　2。8阴性试验
　　按照处方配比称取除萸肉以外的其它成分，按照制备工艺制成阴性溶液，并照样品测定法测定，在主组分出峰处无干扰。
　　2。9样品测定
　　取对照品溶液和样品溶液，各进样10l，按照上述测定法测定，读取峰面积值，计算结果。
　　3讨论
　　3。1在供试品溶液制备方法中，我们对比了超声提取、回流提取、索氏提取等方法，结果表明超声提取完全；对提取时间的考察，分别考察了20分钟、30分钟、40分钟、60分钟，超声提取时间比较表明30分钟、40分钟和60分钟的提取效率一样，而20分钟提取不完全，因此本试验确定超声提取时间为30分钟。
　　3。2本方法简便、快捷、分离度好，测定结果科学、公正、准确、可靠，可作为该制剂质量控制指标之一。