撰文：步步先生 来源：干细胞者说 众所周知，在我们的整个生命周期中，长期存活的造血干细胞 （Hematopoietic stem cell ，HSC） 能够分化为几乎所有类型的血细胞和免疫细胞。几十亿个循环流通的血细胞并不会在体内长期地存活，都是有寿命的。 造血干细胞和她的孩子们 基于干细胞的＂自我更新＂特点，仅仅很少数量的造血干细胞就能产生人体一生当中所需的所有血细胞，堪称四两拨千斤。然而到目前为止，研究人员一直都无法在实验室中培养出足够数量的功能造血干细胞。造血干细胞的扩增，一直是干细胞领域的圣杯！ - 01 - 造血干细胞扩增重大突破 2023年2月22日，国际顶级期刊Nature 一篇论文中，来自东京大学和斯坦福大学的研究团队发表一篇题为 Chemically defined cytokine-free expansion of human haematopoietic stem cells 的文章，发明了 一种化学成分明确且无细胞因子的培养体系，成功在实验室中长期稳定地培养出人源造血干细胞 。 截图来自nature 文章显示： 研究者通过用 化学小分子组合 替换了 重组干细胞因子 （SCF） 和 促血小板生成素 （TPO） ， 开发了一种无细胞因子培养体系。这种培养体系支持脐血造血干细胞的体外大量扩增并能保持其功能性， 同时也支持造血干细胞的克隆扩增，解决了造血干细胞在体外扩增培养的瓶颈 。 培养体系的核心成分是： 740Y-P （一种PI3K激活剂） ， UM171 （一种HSPC扩增化合物） 和 丁酰胺 （一种TPO受体激动剂） ，同时使用Soluplus （聚乙烯醇己内酰胺-聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物，即PCL-PVAc-PE） 替代PVA。这个培养体系中不需要使用血清，不需要 细 胞因子，化学成分明确。 对于这个新的造血干细胞培养体系，我们将其中几个关键问题一一做下解析： - 02 - 解析一：化学成分明确的无细胞因子培养基 结合前期研究， 重组干细胞因子 （SCF） 和促血小板生成素 （TPO） 、聚乙烯醇 (polyvinyl alcohol，PVA) 组合的培养基适合造血干细胞生长。在这种培养条件下，小鼠造血干/祖细胞 （HSPCs） 可迅速扩增，而人类造血干细胞的扩增很有限。而造成这种差异的原因是人类细胞中PI3K和AKT通路活性显著降低。 图1.一种化学成分明确的无细胞因子培养基能在体外维持人类HSPCs 使用化学激动剂740Y-P （PI3K激活剂） 使PI3K磷酸化。研究发现不管有无SCF的存在，740Y-P都能促进HSPCs的增殖，这表明： SCF可以被740Y-P 所替代 。同样， TPO可以被丁酰胺 （TPO受体激动剂） 取代 。不过，2a无细胞因子培养基 （由740Y-P和丁酰胺组成） 只能短期支持人造血干细胞的扩增。 - 03 - 解析二：长期的体外造血干细胞培养 由UM171 （70nM） 、740Y-P （1μM） 和丁酰胺 （0.1μM） 组成的 三激活剂（3a） 培养基是最适合造血干细胞生长的。在这种条件下，人造血干细胞连续培养到30天，可持续增殖14倍。将其进行异种移植16周和24周后发现，在小鼠外周血、骨髓、脾脏中观察到较高的细胞嵌合率 （CD34+、CD45+） 。结果表明： 人造血干/祖细胞可以在3a培养基中稳定增长，可以在体外维持功能至少一个月 。 图2.人类HSPCs在3a培养基中长期体外扩增 - 04 - 解析三 ：己内酰胺聚合物改善造血干细胞的生长 在建立无细胞因子培养体系后，使用 Soluplus （即聚乙烯醇己内酰胺-聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物，PCL-PVAc-PE） 替代PVA，并在 培养30天后观察到总细胞的大约75倍扩增， CD34+细胞的55倍扩增 。异种移植实验发现在小鼠外周血、骨髓和脾脏中，都观察到类似的、稳健的人类细胞嵌合。这表明： 基于PCL-PVAc-PEG 的3a培养体系的细胞实现了体外大量扩增，具有体外功能并且可移植 。 图3. 己内酰胺聚合物的3a培养基支持人类HSCs的体外高效扩增 - 05 - 解析四：造血干细胞长期选择性扩增培养 通过流式细胞术对造血干细胞表面标记物进行分析。结果表明：经过3a培养体系长期培养后，CD34+EPCR+CD90+CD45RA ITGA3+细胞在培养7天后显著富集，表明造血干细胞表型显著富集。经全外显子组测序结果表明，有7个可能导致氨基酸发生变化的突变，有4个剪接位点的突变，但与血液系统恶性肿瘤或克隆造血无关。结果表明： 3a培养体系是安全的 。 图4. 3a培养基长期选择性扩增功能性人类HSCs 造血干细胞培养存在异质性问题。 研究团队发现PCL-PVAc-PEG的3a培养体系 的造血干细胞中，HSPC-HLF细胞群、红细胞系和MgK祖细胞群比例更高，而单核细胞群和粒细胞祖细胞群则更少。结果表明， 3a培养体系具有更低的异质性，更适合长期造血干细胞 （Long-term HSCs , LT-HSCs） 的选择性扩增 。 最后，3a培养体系是否能支持克隆衍生的造血干细胞扩增培养。 结果表 明，50%的受试小鼠在24周后表现出了良好的外周血、骨髓和脾脏嵌合，骨髓和脾脏中有超过5%的多系人类CD45+嵌合率。结果表明， 3a培养体系支持造血干细胞的克隆扩增 。 - 06 - 回顾总结 研究结果显示， 研究者通过用化学小分子组合 （UM171+740Y-P+丁酰胺） 替换了造血干细胞经典培养基中的重组干细胞因子 （SCF） 和促血小板生成素 （TPO） ，开发出一种无细胞因子培养体系，该体系支持脐血造血干细胞的体外大量扩增并能保持其功 能性，适合长期造血干细胞的选择性扩增，同时也支持造血干细胞的克隆扩增，解决了造血干细胞在体外扩增培养的瓶颈。 如果这套培养体系可以成功规模化培养临床级人源造血干细胞，它可能会为再生医学和基础研究做出巨大的贡献。 主要参考文献： https://www.nature.com/articles/s41586-023-05739-9 Hiro Nakauchi教授 Hiro Nakauchi教授，任职于美国斯坦福大学干细胞生物学和再生医学研究所，同时担任筑波大学免疫学教授、东京大学医学部干细胞治疗学教授。 Hiro Nakauchi教授证明了单个造血干细胞可以重建整个造血系统，他的工作目标是将基础研究中的发现转化为实际的医学应用。 《自然 · 综述》：T细胞在衰老中的角色 — END — - 科普 情怀 责任 -
王思聪公司被强制执行9。9万欠款，花1。8万理发，私生活不受影响12月9日，有媒体报道王思聪名下关联的一家企业，被列入执行名单金额为9。9万元。据悉，这家企业名为上海网鱼信息科技有限公司，在一众投资人里，王思聪的占股额为8。9，并且他在这家公司本性难移的贾跃亭，再次割了一波韭菜贾跃亭的好日子可能真的要到头了。最近外媒传来消息，称贾跃亭的法拉第公司由于没有提交第三季度的财务报表，现在已经收到了纳斯达克的退市函。如果在60日之内法拉第依旧没有上交自己的财务报贺子珍去世后，如何安置骨灰引争议，邓小平拍板作出两项重要决定贺子珍是毛泽东的第二任妻子，两人一同走过了中国革命岁月中，最为艰难的日子。但是，在1937年，贺子珍不顾毛主席的再三挽留，毅然决定去往苏联。就这样两人十年的革命感情走到了尽头。贺子沈阳军区第39集团军，驻地为何选址辽阳？辽东腹地的战略要冲沈阳军区第39集团军，驻地为何选址辽阳？辽东腹地的战略要冲什么是敬畏？金一南用一个生动的例子，说明了这两个字。金一南指出，2005年美国前防长拉姆斯菲尔德首次访华，没有看万里长城，科长失踪处长喝酒，林彪掀翻了桌子部队在哪里？电台在哪里无论战场的形势如何，林彪总是能以非常镇定的姿态运筹帷幄，在他打过的战役中，基本都是以胜利而告终。不过，向来冷静的林彪，却有一次不仅掀翻了手下的桌子，更是差点打了人，可以说，这种状态红莲力荐11。24强力阵容，经典斗枪连吃两鸡，塔姆成为斗枪新C位云顶之弈11。24版本在昨天登陆国服，相信很多玩家对于新版本到底玩什么阵容存在着非常多的迷茫，的确11。24版本关于英雄和羁绊的调整非常的多，甚至游戏核心机制海克斯强化都有不小的改新一代的武侠传说天命奇御2评测分析前言当初在一代完了后就特别想着续作，在二代制作消息放出后就一直等着新作的发布，毕竟在我看来一代的虽然有着不足，但是作为一个类似大少爷半为爱发电成立的工作室和项目，能在低成本和没有技DNF似雨幽离被打脸！剑魔让东二梦想截胡，已成职业第一人剑魔身为十剑之一，虽续航比较差劲，爆发却挺强的。似雨幽离对剑魔情有独钟，武器耳环双18搭配改造，缔造了这个职业打桩记录。在认证方面上，除了死灵剑帝和剑魂，也荣获了第一剑魔称谓。只是TGA上新消息不少，我比较感兴趣的是这七款游戏稍早举办的TheGameAwards2021发表会可以说是众星云集，其中既有新作品放出了首波预告，也有未上市的游戏公布了实机演示影片。整个直播盛事耗时长达三个小时左右，内容众多。限28周早产宝宝历险记，医院束手无策，我用爱创造了奇迹今天的文章是我们签约作者卧猫，关于早产和爱的真实故事，特别让人泪目，希望你能从这个故事里看到爱和希望。作者卧猫编辑东坡琅正文共3810字预计阅读时间8分钟2021年6月4日，怀孕2这4类孩子容易得支气管肺炎，家长千万要注意说起小儿支气管肺炎，很多家长都担心得不得了听说支气管肺炎很严重，要住院呢！听说支气管肺炎容易导致呼吸衰竭，还可引起心肌炎等重症疾病！事实上，肺炎也有轻重之分，并不是所有的肺炎都会给